人参皂苷20(S)-Rg3通过调节DNMT3A/miR-603/HK2信号通路抑制卵巢癌细胞Warburg效应  

作　　者：蔡钰峰 刘婷 李峰 黄平 胡典贵 

机构地区：[1]赣南医科大学第一附属医院,江西赣州341000 [2]赣州市立医院 [3]赣州市第五人民医院

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第16期3949-3955,共7页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：江西省卫生健康委科技计划项目(No.202310752)。

摘　　要：目的探究人参皂苷20(S)-Rg3对卵巢癌细胞Warburg效应详细作用机制及其意义。方法采用qRT-聚合酶链反应(PCR)法对20例卵巢癌患者的卵巢癌细胞、癌旁组织中的微小RNA(miR)-603、DNA甲基转移酶(DNMT)3A相对表达水平进行检测。随后以人卵巢癌细胞系SKOV3设置空白对照(NC)组、20(S)-Rg3处理(Rg)组、5-Aza-CdR(5-Aza)组;DNMT3A过表达(DN)组与DNMT3A过表达+20(S)-Rg3处理组(DR)组;使用X-treme GENE siRNA转染mimic miR-603过表达、inhibitor miR-603被抑制和相应的阴性对照基因,并以qRT-PCR和Western印迹法对各组的miR-603、DNA甲基转移酶DN-MT3A水平进行检测,同时观察已糖激酶(HK)2和丙酮酸激酶(PKM2)表达、葡萄糖消耗、乳酸生成和细胞生长等情况;甲基化特异性PCR(MSP)检测miR-603基因启动子区的甲基化水平,双荧光素酶报告基因试验用于验证miR-603与HK2的直接结合。结果相对于癌旁组织,卵巢癌组织miR-603相对水平明显更低,DNMT3A相对水平则明显更高(P<0.05);与NC组相比,Rg组miR-603相对表达、蛋白水平显著上升(P<0.05),5-Aza组miR-603相对表达显著提高(P<0.05);MSP结果显示,Rg组miR-603基因启动子区的甲基化水平显著降低(P<0.05)。与NC组比较,Rg组DNMT3A相对表达及蛋白水平明显下降(P<0.05),而DNMT3B、DNMT1相对表达及蛋白水平上升,但差异无统计学意义(P>0.05)。与NC组相比,DN组miR-603相对表达及蛋白水平明显降低(P<0.05);相较于DN组,DR组miR-603相对表达及蛋白水平明显上升(P<0.05),20(S)-Rg3对miR-603的上调作用被DNMT3A过表达所拮抗。MSP结果显示,经DNMT3A过表达转染后,miR-603基因启动子区的甲基化水平明显升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示,mimic miR-603显著降低了WT HK2-3′UTR荧光素酶报告子转染细胞的荧光素酶活性(P<0.05)。人参皂苷20(S)-Rg3明显抑制葡萄糖消耗和乳酸生成,DNMT3A过表达明显加强葡萄糖消耗和乳酸生成,miR-603过表达明显抑制葡萄�

关 键 词：卵巢癌 人参皂苷20(S)-Rg3 甲基化 微小RNA(miR)-603 Warburg效应 

分 类 号：R737.31[医药卫生—肿瘤]