基于Smads/TGF-β/α-SMA/Collagen信号通路探究miR-6883-3p靶向调控MARCH7在NSCLC发展中的分子机制  

作　　者：陈金虹 茅国新[1] 鲁小敏[1] 

机构地区：[1]南通大学肿瘤学系,江苏南通226600

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第16期3955-3962,共8页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：江苏省卫生健康委科研项目(Z2021090)。

摘　　要：目的基于Smads/转化生长因子(TGF)-β/α-平滑肌肌动蛋白(SMA)/胶原蛋白(Collagen)信号通路探究微小RNA(miR)-6883-3p靶向调控膜相关环指蛋白(MARCH)7在非小细胞肺癌(NSCLC)发展中的分子机制。方法选取NSCLC细胞系,原代培养,选取第3代单层细胞作为研究对象,细胞内进行miR-6883-3p、MARCH7过表达及Smads/TGF-β1信号通路阻断,分为Control组、NC组、pcDNA-miR-688-3p组、pcDNA-MARCH7组、pcDNA-miR+MARCH7组、LY2157299组、pcDNA-MARCH7+LY2157299组,双荧光素基因检测系统确定miR-6883-3p与MARCH7之间靶向关系;检测各组细胞内miR-6883-3p、MARCH7、Smads/TGF-β/α-SMA/Collagen信号通路相关蛋白表达;检测各组细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力;检测各组细胞内Smad3、TGF-β1、α-SMA、CollagenⅠ蛋白表达。结果与NC相比,pcDNA-miR-6883-3p组miR-6883-3p mRNA表达明显上调,pcD-NA-MARCH7组MARCH7 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05);与pcDNA-MARCH7组比较,pcDNA-miR+MARCH7组MARCH7 mRNA及蛋白表达明显下降(P<0.05);miR-6883-3p的mRNA 3′非编码区预测到多个MARCH7结合位点;共转染野生型表达载体活性较其对照显著下调(P<0.05)。与NC组相比,miR-6883-3p过表达抑制NSCLC细胞的增殖活性、迁移、侵袭能力及上皮细胞间充质转化(EMT)进程,促进NSCLC细胞凋亡,上调上B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Cleaved-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3、E-钙黏蛋白(cadherin)蛋白表达,下调Bcl-2、锌指转录因子(Snail)、N-cadherin蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);MARCH7过表达上调NSCLC细胞的增殖活性、迁移、侵袭能力及EMT进程,抑制NSCLC细胞凋亡,下调Bax、Cleaved-caspase-3、E-cadherin蛋白表达,上调Bcl-2、Snail、N-cadherin蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);miR-6883-3p过表达可以明显逆转pcDNA-MARCH7组细胞生物活性趋势(P<0.05)。与NC组相比,LY2157299干预后,Smads/TGF-β/α-SMA/Collagen信号通路关键蛋白Smad3、TGF-β1、α-SMA、Col

关 键 词：非小细胞肺癌 微小RNA(miR)-6883-3p 膜相关环指蛋白(MARCH)7 Smads/转化生长因子(TGF)-β/α-平滑肌动蛋白(SMA)/胶原蛋白(Collagen)信号通路信号轴 细胞活性 

分 类 号：R734.2[医药卫生—肿瘤]