土木香内酯通过上调电压依赖性阴离子通道1调控SCC-25口腔鳞癌细胞的能量代谢和凋亡  

作　　者：王鹏 陈慧 代喆颖 彭红 江铃 周晖 

机构地区：[1]武汉市第三医院口腔科,湖北武汉430000

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第16期4034-4039,共6页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：武汉市卫生计生委医学科学研究项目(WX18C06)。

摘　　要：目的分析土木香内酯(ALT)通过上调电压依赖性阴离子通道(VDAC)1调控SCC-25口腔鳞癌细胞(OSCC)的能量代谢和凋亡。方法将SCC-25细胞分为NC组(转染NC质粒)、ALT 10、20、30μmol/L组(分别以10、20、30μmol/L浓度ALT处理细胞)、小干扰VDAC1(siVC)-2组(转染siVC-2质粒)、siVC-2+ALT 10μmol/L组(siVC-2质粒+10μmol/L浓度ALT处理细胞)、siVC-2+ALT 20μmol/L组(siVC-2质粒+20μmol/L浓度ALT处理细胞)、siVC-2+ALT 30μmol/L组(siVC-2质粒+以30μmol/L浓度ALT处理细胞)。CCK-8检测不同浓度ALT作用细胞后细胞活力。线粒体膜电位(JC-1)试剂盒和二氢乙锭(DHE)探针分别用来检测线粒体膜电位和活性氧的变化;葡萄糖和乳酸试剂盒检测细胞内葡萄糖和乳酸变化;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。Western印迹检测各组行线粒体通路凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的多聚ADP核糖聚合酶(Cleaved-PARP)和糖酵解蛋白组织己糖激酶(HK)2、乳酸脱氢酶(LDH)A及VDAC1蛋白表达水平。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测不同浓度ALT组中VDAC1 mRNA表达水平。结果ALT随着浓度依赖性显著抑制细胞的活性(P<0.05)。ALT呈浓度依赖性促进细胞凋亡(P<0.05)。与NC组相比,不同浓度ALT组中Cleaved-PARP蛋白表达增多,而Bcl-2/Bax蛋白表达减少,差异显著(P<0.05)。ALT呈浓度依赖性下调细胞线粒体膜电位和增加细胞活性氧水平,抑制葡萄糖、乳酸、腺苷三磷酸(ATP)水平,差异显著(P<0.05)。ALT呈浓度依赖性下调糖酵解相关蛋白HK2和LDHA表达,差异显著(P<0.05)。ALT呈浓度依赖性促进VDAC1 mRNA及蛋白表达,差异显著(P<0.05)。与siVC-2组相比,siVC-2+10、20、30μmol/L ALT组中细胞凋亡率明显上升,葡萄糖、乳酸水平及ATP含量减少,差异显著(P<0.05)。结论ALT通过上调VDAC1表达降低细胞糖酵解能力,促进细胞凋亡。

关 键 词：土木香内酯 电压依赖性阴离子通道1 口腔鳞癌细胞 代谢 凋亡 

分 类 号：R739.85[医药卫生—肿瘤]