脑心肌炎病毒VP22A基因真核表达载体的构建  

作　　者：邵帅 纪晓岚[1,2] 刘明启 李琼毅 

机构地区：[1]西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730000 [2]西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州730000

出　　处：《中国动物保健》2025年第1期240-241,共2页China Animal Health

基　　金：西北民族大学中央高校基本科研业务费(31920230154);西北民族大学中央高校基本科研业务费(131920230001);甘肃省自然科学基金(23JRRA720)。

摘　　要：为构建脑心肌炎病毒VP2 2A基因真核表达载体。参考EMCV毒株基因组序列,设计VP2 2A基因特异性引物,PCR扩增VP22A基因目的片段,双酶切目的基因和pc DNA3.1-Flag质粒产生相同的黏性末端,使用T4 DNA连接酶连接相同的黏性末端,连接产物转化至DH5α感受态细胞,菌液PCR鉴定阳性单克隆菌落,对阳性单克隆提取重组质粒并双酶切进行验证,对阳性重组质粒进行测序。重组质粒双酶切和测序结果表明,pc DNA3.1-Flag-VP2和pc DNA3.1-Flag-2A真核表达载体构建成功。

关 键 词：脑心肌炎病毒 VP2基因 2A基因 真核表达载体 

分 类 号：S85[农业科学—兽医学]