靶向MyD88基因siRNA的筛选及其对狂犬病病毒感染的影响初探  

作　　者：蔡宗伶 栗朵朵 谭深根 李晓宁[1,2,3,4,5] 罗廷荣 

机构地区：[1]广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005 [2]广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心,广西南宁530004 [3]广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室,广西南宁530004 [4]广西高校动物疫病预防与控制重点实验室,广西南宁530004 [5]亚热带农业生物资源保护利用国家重点实验室,广西南宁530004

出　　处：《广西畜牧兽医》2025年第1期1-4,共4页Guangxi Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金面上项目(32070161),国家重点研发计划项目子课题(2022YFD1800101),广西自然科学基金面上项目(2020GXNSFAA297212),国家自然科学基金面上项目(31570147)。

摘　　要：为探究MyD88在狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)感染中的作用,本实验针对MyD88的mRNA靶序列设计并合成3对不同的siRNA序列,利用脂质体瞬时转染BV2细胞,通过实时荧光定量PCR及Western blot检测siRNA对BV2细胞中MyD88的干扰效率。结果显示,转染24 h后,各实验组中MyD88 mRNA表达量均显著低于阴性对照组,其中siRNA-M174的效果最佳、siRNA-M587次之;将200 nM siRNA-M174、siRNA-M587转染BV2细胞24 h后,经计算,干扰效率分别为75.35%和71%,两者共转染后,干扰效率为86.5%。结果表明,本实验成功筛选出靶向MyD88基因的有效干扰序列。脂质体瞬时转染筛选出的2对siRNA于BV2细胞,RABV接种BV2细胞,通过实时荧光定量PCR及Western blot检测。接毒后转染24 h,实验组MyD88基因的mRNA表达量低于阴性对照组,MyD88蛋白及RABV的N蛋白表达量下降。本实验结果证实了MyD88基因被特异性siRNA干扰后,也影响RABV的蛋白合成,为后续MyD88与狂犬病病毒的互作研究提供实验依据。

关 键 词：MYD88 SIRNA RNAI 狂犬病病毒 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]