LncRNA TRG-AS1调节miR-802/DDIT4轴对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响  

作　　者：唐岱 葛华 王灿 

机构地区：[1]遵义市第一人民医院(遵义医科大学第三附属医院)胃肠外科,贵州遵义563000

出　　处：《中国老年学杂志》2025年第4期978-984,共7页Chinese Journal of Gerontology

摘　　要：目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)T细胞受体γ位点反义RNA(TRG-AS)1调节miR-802/DNA损伤诱导转录子(DDIT)4轴对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western印迹、免疫组化法分别检测36例CRC患者癌组织、癌旁组织和正常人结肠黏膜上皮细胞及人CRC细胞中TRG-AS1、miR-802、DDIT4表达;将人HCT116细胞分成si-TRG-AS1组、si-NC组、si-TRG-AS1+miR-802 inhibitor组、si-TRG-AS1+inhibitor-NC组和control组;qRT-PCR检测细胞中TRG-AS1、miR-802表达水平;噻唑蓝(MTT)法、划痕实验、Transwell小室和流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡;Western印迹检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2及DDIT4蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验、RNA下拉验证TRG-AS1和miR-802、miR-802和DDIT4的关系。小鼠体内肿瘤形成实验验证TRG-AS1对CRC肿瘤生长的影响。结果与癌旁组织和NCM460细胞比较,在CRC组织和细胞中,TRG-AS1、DDIT4水平明显增加,miR-802水平明显下降(P<0.05)。敲低TRG-AS1能抑制HCT116细胞迁移、侵袭和增殖,降低MMP-2、PCNA、Bcl-2、DDIT4蛋白及TRG-AS1表达,上调miR-802表达、细胞凋亡、提高Bax蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。下调miR-802后,miR-802、Bax蛋白表达水平降低,PCNA、MMP-2、Bcl-2、DDIT4蛋白水平上调,减弱了TRG-AS1敲低对HCT116细胞迁移、增殖、侵袭和凋亡的调节作用,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实TRG-AS1靶向调控miR-802表达,miR-802靶向负调控DDIT4表达,且RNA下拉实验证实了TRG-AS1与miR-802结合(P<0.05);体内研究结果显示,沉默TRG-AS1表达明显抑制移植瘤生长(P<0.05)。结论TRG-AS1在CRC组织和细胞中上调表达,抑制TRG-AS1表达可通过调节miR-802/DDIT4轴,抑制CRC恶性进展。

关 键 词：LncRNA T细胞受体γ位点反义RNA(TRG-AS)1 miR-802/DNA损伤诱导转录子(DDIT)4轴 结直肠癌 恶性生物学行为 

分 类 号：R735.34[医药卫生—肿瘤]