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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:李宏丽 范林林 康霞 韦海涛 李丽 何文亚 LI Hong-Li;FAN Lin-Lin;KANG Xia
机构地区:[1]河南大学淮河医院神经内科,河南开封475001 [2]河南大学护理与健康学院,河南开封475001 [3]河南大学淮河医院胸外科,河南开封475001 [4]河南大学基础医学院,河南开封475001
出 处:《中国老年学杂志》2025年第7期1663-1673,共11页Chinese Journal of Gerontology
基 金:河南省教育厅项目(No.232102230092);河南省高等学校重点科研项目(No.23B320007,25B320014);河南省科技厅科技攻关项目(No.252102311055,252102311053)。
摘 要:目的探究LINC00626通过Janus激酶(JAK)1/信号转导和转录激活因子(STAT)3/KH型剪切蛋白(KHSRP)信号轴调控胶质瘤恶性进展及分子机制。方法细胞功能实验:取胶质瘤细胞系A172、U251、U118MG、SHG-44及人正常星形胶质细胞系(NHA),采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00626、KHSRP mRNA表达。对胶质瘤细胞系进行慢病毒稳定转染,分为:sh-NC组、sh-LINC00626组、Vector组、LINC00626组、sh-LINC00626+Vector组和sh-LINC00626+KHSRP组。细胞计数试剂盒(CCK)-8实验、细胞菌落形成实验、细胞划痕实验、Transwell小室迁移/侵袭实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力等生物学特征。采用Western印迹法检测稳定转染胶质瘤细胞中KHSRP蛋白表达。病例组织标本实验:收集手术切除且经病理检验确诊为胶质瘤的144例肿瘤组织(实验组)及同期行内减压术获得的正常脑组织(对照组),采用qRT-PCR法检测各组组织标本中LINC00626、KHSRP mRNA表达。裸鼠体内实验:皮下荷瘤:将32只裸鼠按随机数字表法分为sh-NC-1组、sh-LINC00626-1组和Vector-1组、LINC00626-1组,每组8只,皮下注射稳转慢病毒的A172和SHG-44细胞。分别于第20天(敲降组)和第22天(过表达组)处死并解剖,分别测量各组裸鼠的肿瘤体积/重量。尾静脉注射肺转移模型:将20只裸鼠按随机数字表法分为sh-NC-1组、sh-LINC00626-1组和Vector-1组、LINC00626-1组,每组5只,尾静脉注射稳转慢病毒的A172和SHG-44细胞,分别于第35天(敲降组)和第42天(过表达组),以颈椎脱臼法处死裸鼠,并计数各组肺部转移病灶数目。分子机制实验:qRT-PCR及Western印迹实验检测KHSRP蛋白对JAK/STAT信号通路相关mRNA及蛋白水平影响。将LINC00626进行慢病毒敲降与KHSRP过表达后共转染到A172和U251细胞进行拯救实验,通过CCK-8、Transwell小室实验验证KHSRP可逆转敲降LINC00626后对神经胶质细胞瘤细胞增殖、迁移/侵袭的抑制作用。结�
关 键 词:胶质瘤 LINC00626 Janus激酶(JAK)1/信号转导和转录激活因子(STAT)3 KH型剪切蛋白(KHSRP) 增殖 侵袭 转移
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