基于原位酶灌注法的大鼠肝星状细胞的简便分离法  

作　　者：朱永建 黄海锋 刘琳 梁海斯 李观 邓舒妮 冯敏玲 

机构地区：[1]肇庆医学院,广东肇庆526020

出　　处：《内蒙古医学杂志》2025年第3期364-367,共4页Inner Mongolia Medical Journal

基　　金：广州市科技计划项目(编号:201707010356)。

摘　　要：目的探索一种简单、经济、实用、可靠的分离大鼠肝星状细胞方法,为深入研究肝纤维化形成机制奠定基础。方法麻醉、暴露腹腔后经门静脉插管,先肝素化大鼠,再剪破下腔静脉,利用D-Hanks经留置针灌流肝至土黄色,封闭上下腔静脉,注入链霉蛋白酶、Ⅳ型胶原酶后摘除肝脏,将肝脏匀浆化后加入Ⅳ型胶原酶、链霉蛋白酶和DNA酶Ⅰ溶液中振荡消化,利用Nycodenz密度梯度离心获得肝星状细胞,并进行体外培养及鉴定。结果细胞得率约4.2×10^(7)个/肝,细胞活力>90%,α-SMA免疫化学染色、Desmin免疫化学染色鉴定纯度>90%。结论该方法简单、经济、实用、可靠,为进一步研究肝星状细胞与肝纤维化的关系,尤其为分子生物学水平及细胞水平的研究奠定了基础。

关 键 词：肝纤维化 肝星状细胞 细胞分离 原代培养 

分 类 号：R575.2[医药卫生—消化系统]