敲除基因VEGFR2的肿瘤浸润T淋巴细胞回输对小鼠结肠癌血管形成的影响  

作　　者：王辰啸 李晓辉[1] 郭建辉 陈华涛[1] 吴彪[1] 瞿紫微[1] 

机构地区：[1]武汉市第一医院胃肠外科,湖北武汉430022

出　　处：《中国老年学杂志》2025年第8期1959-1968,共10页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：武汉市卫健委医学科研项目(No.WX21A11)。

摘　　要：目的 探讨敲除基因血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体(VEGFR)2的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)回输对结肠癌小鼠血管形成的影响。方法 皮下注射CT26构建小鼠结肠癌模型,以3只模型小鼠的肿瘤组织提取TIL,并提取血浆中的淋巴细胞;短发夹状RNA(shRNA)基因编辑技术沉默VEGFR2;淋巴回输动物体内实验部分分为对照(Control)组、血浆淋巴细胞(Lym)组、荷瘤小鼠TIL(TIL)组、LV-GFP-VEGFR2-ShRNA1(VEGFR2-ShRNA1)组各10只:检测各组肿瘤组织质量及肿瘤抑制率;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记试剂盒(TUNEL)检测各组肿瘤组织中的细胞凋亡;酶联免疫吸附(ELISA)检测各组肿瘤组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α和肿瘤细胞γ干扰素(IFNγ)含量;流式细胞术检测肿瘤组织中CD4^(+)、CD8^(+)T细胞水平;免疫组化检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、VEGFR2、VEGF、N-钙黏连蛋白(cadherin)和E-cadherin表达;免疫荧光检测肿瘤组织中血管新生;Western印迹检测肿瘤组织中VEGFR2、VEGF、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果 与Control组相比,Lym组、TIL组、VEGFR2-ShRNA1组肿瘤组织质量、血管新生数量、VEGFR2、VEGF和Bcl-2表达明显降低,肿瘤抑制率、细胞凋亡率、TNF-α、IFNγ、CD4^(+)、CD8^(+)T水平及Bax表达明显升高(P<0.05);与Lym组相比,TIL组、VEGFR2-ShRNA1组肿瘤组织质量、血管新生数量、VEGFR2、VEGF和Bcl-2表达明显降低,肿瘤抑制率、细胞凋亡率、TNF-α、IFNγ、CD4^(+)、CD8^(+)T水平及Bax表达明显升高(P<0.05);与TIL组相比,VEGFR2-ShRNA1组肿瘤组织质量、血管新生数量、VEGFR2、VEGF和Bcl-2表达明显降低,肿瘤抑制率、细胞凋亡率、TNF-α、IFNγ、CD4^(+)、CD8^(^(+))T水平及Bax表达明显升高(P<0.05)。结论 敲除基因VEGFR2的TIL回输能明显抑制结肠癌小鼠肿瘤组织中PCNA、VEGF及N-cadherin表达,增强CD4^(+)、CD8^(+)T细胞浸润,诱导肿瘤细胞凋亡,发挥抑制肿瘤�

关 键 词：敲除基因 短发夹状RNA 结肠癌 血管内皮细胞生长因子受体2 肿瘤浸润淋巴细胞 肿瘤生长 

分 类 号：R735.35[医药卫生—肿瘤]