登革2型病毒乳鼠神经毒力相关位点的研究  

作　　者：赵卫[1] 范宝昌[1] 胡志君[1] 陈水平[1] 王鹏程[1] 苑锡同[1] 李晓萸[1] 于曼[1] 秦鄂德[1] 杨佩英[1] 

机构地区：[1]军事医学科学院微生物流行病研究所,北京100071

出　　处：《中国科学（C辑）》2002年第6期552-558,共7页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金资助项目(批准号:30000144)

摘　　要：pDVWS501为含有登革2型病毒全长cDNA的质粒,可利用感染性转录体技术恢复为有活力的病毒MON501.将MON501注射乳鼠脑内可引发脑炎症状,其E蛋白的62,203位分别为Glu,Asn.采用OL-PCR方法把pDVWS501 E62位氨基酸突变为Lys,得到质粒TB62;E203位氨基酸突变为Asp,得到质粒TB203.将pDVWS501,TB62和TB203酶切后体外转录得到全长登革2型病毒转录体,应用电穿孔技术转染BHK-21细胞,7天后收毒.RT-PCR证实有登革2型病毒存在,接种C6/36细胞,3～5 d可使其产生典型病变.测定突变区域的序列,结果表明得到了恢复病毒MON501和E62,E203位点突变的重组病毒HFT62,HFT203.3株病毒均在其基因组5’端加“G”,3’端则与登革2型病毒野生株相同.分别将3株病毒稀释至105～102TCID50,经脑内途径注射1日龄乳鼠,发现与MON501相比,HFT62,HFT203在同一稀释度发病乳鼠的个数减少,发病时间延长且差异显著,表明E62,E203可能是登革2型病毒乳鼠神经毒力相关位点.

关 键 词：乳鼠 神经毒力 登革2型病毒 毒力相关位点 感染性转录体 点突变 登革疫苗 登革热 

分 类 号：R373[医药卫生—病原生物学]