16S～23S rDNA间隔区序列寡核苷酸探针不同显色方法对结核患者痰标本的检测  

作　　者：张灵霞[1] 庄玉辉[1] 杨华卫[1] 李邦印[1] 夏湘萱[1] 

机构地区：[1]中国人民解放军第309医院结核病研究室,北京100091

出　　处：《临床检验杂志》2003年第1期25-26,共2页Chinese Journal of Clinical Laboratory Science

摘　　要：目的　评价 16S～ 2 3SrDNA间隔区序列寡核苷酸探针碱性磷酸酶显色与辣根过氧化物酶化学发光法对结核患者痰标本检测的应用价值。方法　采用生物素标记 5′端 18bp的寡核苷酸探针斑点杂交的碱性磷酸酶显色反应及辣根过氧化物酶化学发光检测 90例结核患者和 30例非结核患者痰标本。结果　痰标本基因组DNA直接与探针杂交 ,碱性磷酸酶显色反应检测阳性率为 2 2 2 % ,辣根过氧化物酶化学发光检测阳性率为 33 3% ;痰标本经引物PL1、PL2扩增 (扩增产物 35 0bp ,)与寡核苷酸探针杂交 ,碱性磷酸酶显色反应检测阳性率为 77 8% ,辣根过氧化物酶化学发光检测阳性率为 83 3% ;痰标本经引物b扩增 (扩增产物 2 5 0bp)与探针杂交 ,碱性磷酸酶显色和化学发光检测阳性率分别为 75 6 %、80 0 % ,检测的敏感性高于痰涂片。寡核苷酸探针与 30例非结核患者痰标本DNA杂交则全为阴性。结论　寡核苷酸探针和 2 5 0bpPCR扩增产物相结合 ,经化学发光显色是分枝杆菌检测的一种有效方法。

关 键 词：16S-23rDNA间隔区 寡核苷酸探针 斑点杂交 化学杂光法 碱性磷酸酶显色法 

分 类 号：R446.5[医药卫生—诊断学]