稳定表达M-CSF及其受体的人—鼠嵌合肿瘤细胞系的建立及性质  

ESTABLISHMENT AND CHARACTERIZATION OF CHIMERIC HUMANMURINE TUMOR CELL LINES STABLY EXPRESSING HUMAN M-CSF AND ITS RECEPTOR.

作　　者：王敏慧[1] 林永敏[1] 宋玉华[1] 郑国光[1] 吴克复[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院血液学研究所,天津300020

出　　处：《白血病．淋巴瘤》2003年第1期3-7,共5页Journal of Leukemia & Lymphoma

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (项目编号 :3 9980 0 14 )

摘　　要：目的 :建立稳定表达人巨噬细胞集落刺激因子受体 (M- CSFR)或人巨噬细胞集落刺激因子受体—膜结合型巨噬细胞集落刺激因子 (M- CSFR- m- M- CSF)的人—鼠嵌合肿瘤细胞系 ,作为研究肿瘤免疫治疗的实验模型。方法 :用 PCR技术构建 M- CSFR- m- M- CSF融合 c DNA的真核表达载体。将携带 M- CSFR及 M- CSFR- m- CSF的重组质粒转染小鼠骨髓瘤细胞系 SP2 / 0 ,G4 18筛选所得的混合克隆 ,有限稀释后克隆化培养。结果 :得到 3株稳定表达人 M- CSFR和 4株稳定表达人 M- CSFR- m- M-CSF的嵌合肿瘤细胞系。ABC免疫酶标法和 RT- PCR法证实所获细胞系有明显的目的蛋白表达。皮下接种 BAL B/ c小鼠成瘤率 10 0 %。结论 :建立了稳定表达人 M- CSFR或人 M- CSFR- m- M- CSF的人—鼠嵌合肿瘤细胞系 ,并已成功地用于 M- CSF及其受体 DNA疫苗免疫效应的研究。其原理和方法可供同类研究工作借鉴。Objective:To establish chimeric human murine tumor cell lines expressing human M CSFR and M CSFR m M CSF as model for anti tumor immunological study.Methods:Eukaryotic expression vector encoding M CSFR m M CSF fusion DNA was constructed by PCR.Murine myeloma cell line SP2/0 was transfected with recombinant plasmids encoding M CSFR and M CSFR m M CSF respectively.Mixed clones were screned via G418 and limiting dilution assay.Results:Three cell lines stably expressing M CSFR and four expressing M CSFR m M CSF were obtained.RT PCR assay and ABC immunocytochemical staining demonstrated the expression of target protein.Conclusion:Chimeric human murine tumor cell lines expressing human M CSFR and M CSFR m M CSF were established and had been successfully used as expreimental model for anti tumor immuno therapy.

关 键 词：巨噬细胞集落刺激因子 巨噬细胞集落刺激因子受体 人-鼠嵌合肿瘤细胞系 实验模型 

分 类 号：R73-3[医药卫生—肿瘤]