HCV、NS5A区部分基因克隆和序列分析  

Analysis on cloning and sequencing of NS5A region of Hepatitis C virus

作　　者：张寿国[1] 潘卫[2] 李慧[3] 邓松华[1] 仇小芳[2] 朱扬[1] 

机构地区：[1]安徽医科大学病理生理学教研室,安徽合肥230032 [2]第二军医大学微生物学教研室,上海200433 [3]上海复旦大学医学院,上海200032

出　　处：《疾病控制杂志》2003年第2期103-105,共3页Chinese Journal of Disease Control and Prevention

基　　金：国家自然科学基金 (编号 30 170 85 6 )

摘　　要：目的　研究输血后肝炎病人的基因型 ,探讨 HCV抵抗 IFN疗效的作用机制。方法　以RT- PCR从慢性丙肝病人血清中扩增一段 4 86 bp的 c DNA片段作目的基因 ,插入 PQE30的多克隆位点 ,构建重组质粒 PQE30 - NS5 A- 1U 1D。结果　应用限制酶酶切和测序分析 ,证实 PQE30 -NS5 A- 1U1D中克隆基因是 HCVJ的 NS5 A部分序列 ,核苷酸和氨基酸序列同源性均在 90 %以上 ,包含有干扰素敏感决定区 (ISDR)。结论　血清学抗体检测 NS5 A片段对 HCV诊断有独特的应用价值 。Objective To study the genotype of a patient after infecting Hepatitis C virus and analyse the mechanism which HCV resists to effect of β IFN. Methods A gene fragment about 486 bp of NS5A of HCV was cloned by RT PCR and gene recombinant techniques from the serum of a chronic HCV infected patient. The fragment was inserted into PQE30 vector and constructed the recombined plasmid: PQE30 NS5A 1U1D. Results Identified by restriction enzyme digestion and DNA sequencing , the NS5A cDNA fragment shared over 96% nucleotide acid and amino acid homology with HCVJ, including the interfon sensitivity determining region (ISDR). Conclusions Detection of antibody to HCV NS5A has a unique value in HCV diagnosis and may be helpful for evaluation of anti HCV therapy.

关 键 词：C型肝炎样病毒属 遗传学 序列分析 

分 类 号：R373.21[医药卫生—病原生物学] R394.3[医药卫生—基础医学]