蚯蚓纤溶酶的分离纯化及其部分酶学性质的研究  

Purification and Some Properities of Fibrinolytic Enzyme from Pheretima

作　　者：王雪英[1] 伍晓斌[2] 徐凤彩[3] 

机构地区：[1]湖北农学院生命科学院,荆州434025 [2]中国科学院微生物研究所,北京100080 [3]华南农业大学生命科学院,广州510642

出　　处：《药物生物技术》2003年第2期88-91,共4页Pharmaceutical Biotechnology

基　　金：广东省教育厅资助项目 ( 2 0 0 0 0 1)

摘　　要：以野生环毛蚓 (Pheretima)为材料 ,经匀浆抽提、热变性、硫酸铵分步沉淀、SephadexG 75凝胶过滤和DEAE 纤维素离子交换柱层析等纯化步骤 ,得到纯度较高的蚯蚓纤溶酶 (EFE) ,具有强烈的溶解血纤维蛋白的作用。同时对酪蛋白和BAEE也具有较强的水解作用 ,但对ATEE无水解活性。实验表明蚯蚓纤溶酶能被苯甲磺酰氟强烈抑制 ,说明该酶是丝氨酸蛋白酶、属胰蛋白酶类。金属离子Na+、K+、Mg2 +对此酶有一定的抑制作用 ,Hg2 +对EFE有强烈抑制作用 ,而Ca2Earthworm fibrinolytic enzyme(EFE) is a kind of serine type protease, which can hydrolyze fibrin, casein and Benzoy-L-Agrinine Ethylester(BAEE). Thr ou gh selective thermal denaturation, 30～70% salt fraction precipitation, Sephadex G-75 filtration and DEAE-cellulose ion exchange chromatography, EFE was purifi ed by 5.47 folds with a specific activity of 2080U/mg and a yield of 19%. When sub jected to SDS-PAGE, the purified EFE showed two protein bands. The metal ions Na +,K +,Mg 2+ show some inhibition and Hg 2+ shows s trong inhibition .The metal ion Ca 2+ can increase EFE activity.The inhibitor PMSF effects E FE activity with the concentration of PMSF.

关 键 词：蚯蚓纤溶酶 分离 纯化 酶学性质 研究 

分 类 号：Q55[生物学—生物化学]