钙调素ELISA定量检测方法的建立与实验条件优化  被引量:2

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作  者:王娟[1] 李晓军[1] 潘继文[2] 虞伟[1] 廖建辉[3] 赵慧斌[1] 王艾丽[1] 武建国[1] 

机构地区:[1]南京军区南京总医院全军医学检验中心,江苏南京210002 [2]安徽合肥市第一人民医院检验科,安徽合肥230061 [3]东南大学国家教委分子与生物分子电子学开放实验室,江苏南京210096

出  处:《解放军检验医学杂志》2003年第1期41-44,共4页

摘  要:目的 研究ELISA法定量测定钙调素(CaM)的最优条件。方法 用重组人CaM、免抗CaM,通过对聚苯乙烯反应板进行紫外辐照处理,改善抗原因相化条件;通过对抗原包被液、包被时间等条件优化,建立简便、快速、准确的ELISA定量技术。结果 以pH7.4 0.01mol/L的PB为包被液,包被及后续封闭时间为4℃静置72h,CaM包被浓度为5-8g/ml,抗原抗体反应时间为37℃ 60min,可获最佳CaM定量结果。结论 建立的检测CaM的ELISA测定方法,敏感性、重复性均在临床检测可接受的范围内,标准曲线的线性也较好,可用于细胞内外CaM的定量研究。

关 键 词:钙调素 ELISA 定量检测 实验条件优化 包被液 抗原包被浓度 灵敏度 真核细胞 Ca^2+结合蛋白 

分 类 号:Q513[生物学—生物化学]

 

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