乙型肝炎病毒核壳蛋白变异株在HepG2细胞的HLA-I表达  

作　　者：陈伟红[1] 何海棠[2] 张明霞[2] 刘志华[2] 周永兴[1] 

机构地区：[1]中国人民解放军第四军医大学唐都医院传染科,陕西省西安市710038 [2]中国人民解放军第一军医大学南方医院传染科,广东省广州市510515

出　　处：《世界华人消化杂志》2003年第7期966-969,共4页World Chinese Journal of Digestology

摘　　要：目的：研究HBV adr亚型野生株和核壳蛋白变异株在HepG2细胞表面的HLA-I／抗原肽复合物的表达．方法：通过定点突变技术将1．2拷贝HBV野生型质粒p3．8Ⅱ构建成核壳蛋白变异株V60和L97．经序列测定和生物学活性检测后，野生株和变异株重组质粒分别亚克隆入EB病毒表达载体EBO-plpp以稳定表达．重组载体EBO-野生株、EBO-V60和EBO-L97分别作内切酶双酶切和序列测定鉴定，再用脂质体介导转染HepG2细胞，ELISA(Abbott)试剂盒定量检测各株培养上清HBV抗原，转染细胞用FITC标记的鼠抗HLA-ABC单抗染色，流式细胞术分析细胞表面HLA—I表达．结果：3株重组载体经内切酶消化，电泳后显示2条区带，分别与1．2拷贝HBV基因组和EBO载体大小相同．测序结果证实EBO-V60和EBO-L97分别在nt2078c→G和nt2189A→C，保持原定点突变．EBO-野生株的培养上清HBeAg定量S／CO值明显高于变异株V60和L97，3株：HBsAg定量S／N值接近，HBsAg表达相近表明实验的转染效率相当．EBO空载体转染的HepG2细胞HLA-I轻微表达，3株重组载体转染细胞HLA—I的荧光强度不同，野生株增强为18．2，L97明显升高至34．5，而V60降低至3．4．结论：HBV能增强HepG2细胞表面HLA-I／抗原肽复合物的表达，核壳蛋白热点变异V60和L97可使宿主细胞HLA-I表达发生变化。

关 键 词：乙型肝炎病毒 核壳蛋白变异株 HEPG2细胞 HLA-I 野生株 流式细胞术 基因表达 

分 类 号：R512.62[医药卫生—内科学] R373[医药卫生—临床医学]