刘志华

作品数：7被引量：7H指数：2
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供职机构：中国人民解放军第一军医大学第一附属医院更多>>
发文主题：克隆乙型肝炎病毒HBV免疫应答野生株更多>>
发文领域：医药卫生生物学更多>>
发文期刊：《热带医学杂志》《解放军医学杂志》《世界华人消化杂志》《中国公共卫生》更多>>
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一株鸭乙型肝炎病毒DHBV全基因的克隆和序列分析被引量：2
《第一军医大学学报》2004年第4期404-407,共4页梁蔚芳 刘志华 何海棠 骆抗先 
军队"十五"重点课题(01Z046)~~
目的从本地樱桃谷鸭血清中克隆鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA,并进行序列分析.方法用PCR扩增DHBV全基因,连接至T载体上,挑选克隆进行测序分析,与GenBank中16株DHBV全基因组进行同源性比较,并进行分子进化树分析.结果24-18与16株DHBV基因组比...
关键词：鸭乙型肝炎病毒 DHBV全基因 克隆 序列分析 
乙型肝炎病毒C基因G87变异对宿主细胞HLA-I表达的影响被引量：1
《解放军医学杂志》2004年第3期246-247,共2页陈伟红 刘志华 潘蕾 张岩 张颖 洪沙 王九平 周永兴 
目的　探讨HBVC基因G87变异对宿主细胞表面HLA I表达的影响。方法　采用定点突变技术和亚克隆技术 ,将HBV野生型基因组质粒构建为C基因G87变异株表达载体 (EBO G87)和野生株表达载体 (EBO WT) ,以脂质体技术分别转染HepG2细胞 ,转染细胞...
关键词：肝炎病毒 乙型 点突变 基因 MHC I类 调节 
缺失耶尔森菌HPI irp6基因EAggEC的构建被引量：1
《中国公共卫生》2003年第6期641-643,共3页胡静 俞守义 阚飙 刘志华 
国家重点基础研究发展规划项目资助 (G19990 54 10 1)
目的　构建小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6重组自杀质粒 ,并应用其构建EAggEC上该基因的缺失株。方法　根据已知小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6基因序列 ,设计PCR引物 ,扩增并克隆了irp6结构基因 ,在体外进行精确突变后 ,插入氯霉素...
关键词：毒力岛 强毒力岛 耶尔森菌 自杀质粒 
HBV全基因核心蛋白变异株稳定表达载体的构建及其抗原表达被引量：2
《解放军医学杂志》2003年第4期324-325,共2页陈伟红 刘志华 王九平 何海棠 骆抗先 
通过定点突变技术将HBV质粒p3.8Ⅱ构建成核心蛋白变异株V6 0和L97。经序列测定和生物学活性检测后 ,亚克隆入EB病毒稳定表达载体。重组载体分别作内切酶酶切鉴定和序列测定证实 ,用脂质体介导转染HepG2 细胞稳定传代 ,定量测定各株培养...
关键词：HBV 全基因核心蛋白变异株 稳定表达载体 构建 EB病毒 
乙型肝炎病毒核壳蛋白变异株在HepG2细胞的HLA-I表达被引量：3
《世界华人消化杂志》2003年第7期966-969,共4页陈伟红 何海棠 张明霞 刘志华 周永兴 
目的：研究HBV adr亚型野生株和核壳蛋白变异株在HepG2细胞表面的HLA-I／抗原肽复合物的表达．方法：通过定点突变技术将1．2拷贝HBV野生型质粒p3．8Ⅱ构建成核壳蛋白变异株V60和L97．经序列测定和生物学活性检测后，野生株和变异株重...
关键词：乙型肝炎病毒 核壳蛋白变异株 HEPG2细胞 HLA-I 野生株 流式细胞术 基因表达 
一株输血传播病毒新变种的克隆和序列分析
《第一军医大学学报》2002年第8期690-692,共3页刘志华 骆抗先 何海棠 
军队九五医药卫生科研基金(98z073)
目的从1例不明原因转氨酶升高的病人血清中克隆输血传播病毒(TTV)DNA,并进行序列分析。方法用巢式PCR扩增TTVDNA长片段,连接至pGEM-T载体上,挑选一个克隆(56-B)进行测序。将56-B与GenBank中五株TTV进行氨基酸和核苷酸序列的同源性分析,...
关键词：输血传播病毒 基因异质性 巢式PCR 
两种DNA的PCR产物克隆入同一载体的构建策略
《热带医学杂志》2001年第2期133-135,共3页胡静 俞守义 刘志华 李文全 
国家重点基础研究发展规划项目资助(No.G19990 5 410 1)
目的　以克隆小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛可变区首尾区域的双独立片段为例 ,探讨克隆入同一载体的基因数多于一个时可采取的构建策略。方法　在一个基因A正义引物与另一基因B负义引物的 5′端分别设计与克隆载体相匹配的酶切位点 ,在B...
关键词：克隆 DNA重组 小肠结肠炎耶尔森菌 可变区 
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