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作 者:马春树[1] 宁钧宇[1] 由江峰[1] 柳林 郑杰[1] 方伟刚[1] 王洁良[1] 崔湘琳[1] 吴秉铨[1]
机构地区:[1]北京大学医学部病理系,北京100083 [2]北京大学医学部医药卫生分析中心,北京100083
出 处:《中国科学(C辑)》2003年第4期338-346,共9页Science in China(Series C)
基 金:国家自然科学基金目资助项目(批准号:30170363);教育部科学研究重大项目(批准号:01003);国家重点基础研究发展规划资助项目(批准号:2002CB513100);国家"十五"科技攻关项目(批准号:2001BA703B05);北京大学211项目
摘 要:TMSG-1是用mRNA差异显示技术克隆的转移相关基因,它在高转移肿瘤细胞系和有转移的肿瘤组织中表达下降。以高转移的前列腺癌细胞系PC-3M-1E8为受体细胞,通过基因转染技术观察了TMSG-1基因表达对细胞V-ATPase活性、细胞内pH值和细胞凋亡情况的影响,同时利用GFP对TMSG-1细胞内定位进行了分析。结果表明,V-ATPase在PC-3M-1E8细胞系,转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系的活性无明显差异。在转染正义TMSG-1的细胞系中,V-ATPase的活性比PC-3M-1E8细胞系,转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系均有明显增高(P<O.001).利用pH敏感性荧光探针BCECF测定细胞内的pH值,结果显示转染正义TMSG-1组的pHi值有明显提高。细胞凋亡的检测结果表明,转染正义TMSG-1组细胞凋亡明显增多(P<0.001),BCL2的表达显著下降。TMSG-1蛋白的细胞内定位分析表明,TMSG-1是一个跨膜蛋白,定位于内质网、线粒体等细胞质膜系统。实验结果表明,前列腺癌细胞系中TMSG-1的上调可以提高细胞V-ATPase的活性,增加细胞内的pH值,同时TMSG-1的上调还可抑制BCL2的表达,促进细胞凋亡的发生。
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