相思豆毒素诱导肿瘤细胞凋亡及其机制  

作　　者：钟玉绪[1] 应翔宇[1] 李延生 李丽琴[3] 张守兰[3] 林福生[3] 

机构地区：[1]军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850 [2]北京金赛狮生物药业有限公司,北京100081 [3]解放军防化研究院,北京102205

出　　处：《中国药理学与毒理学杂志》2003年第4期310-311,共2页Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology

摘　　要：目的　为相思豆毒素 (ABR)的开发应用提供实验依据。方法　采用电镜、激光共聚焦显微镜(Confocal)、流式细胞术 (FCM)、DNA片段检测、免疫组化等实验技术进行研究。结果　ABR作用体外培养HEK细胞 12h后 ,对细胞增殖抑制作用的IC50为 16 0mmol·L- 1,加入升高胞内体pH的药物NH4 Cl。NH4 Cl 1mmol·L- 1即能明显增强ABR对细胞增殖的抑制作用 ,耗竭胞内Ca2 +的药物EGTA 5mmol·L- 1,则能明显减弱ABR对细胞增殖的抑制作用 ;电镜、Confocal观察结果表明 ,ABR 1,10 μg·L- 1作用细胞 12h后呈现典型的细胞凋亡形态学特征 ,出现核染色质凝集、染色质着边、核碎片及凋亡小体等 ;随着ABR作用细胞时间的延长 ,G0 /G1期细胞逐渐增加 ,作用 6h后G0 /G1期细胞由对照组的39 .6 %增高至 6 6 .9% ;ABR 10 ,10 0 μg·L- 1作用细胞12h的凋亡率分别为 17.6 % ,2 7.2 % ;ABR 10 ,10 0μg·L- 1作用 12h细胞的DNA均出现典型DNA梯带 ;利用抗P5 3蛋白单克隆抗体、抗细胞周期素D1蛋白单克隆抗体 ,对ABR 1μg·L- 1作用 12h细胞的相应蛋白进行检测 ,两种蛋白的免疫组化染色均较对照组明显减弱。结论　升高胞内pH的药物能增加ABR对细胞增殖的抑制作用 ,胞内Ca2 +减少则能减弱ABR对细胞增殖的抑制作用 ;ABR体外能诱导HEK细胞凋亡 ;

关 键 词：相思豆毒素 肿瘤 细胞凋亡 细胞周期 

分 类 号：R73-36[医药卫生—肿瘤]