水稻基因组DNA的RAPD扩增研究  

Study on RAPD Reaction System for the Rice

作　　者：朱必凤[1] 吴成钢[2] 廖朝晖[1] 刘安玲[1] 刘主[1] 

机构地区：[1]韶关学院英东生物工程学院,广东韶关512005 [2]南昌大学生命科学与食品工程学院,江西南昌343000

出　　处：《中山大学学报（自然科学版）》2003年第6期87-90,共4页Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(001446)

摘　　要：通过对水稻RAPD反应条件比较研究,建立了对除草剂敏感致死水稻RAPD的最适反应体系和反应扩增程序,即在25μL反应体系中,含10mmol LTris＿HCl(pH8 0),10mmol LKCl,8mmol L(NH4)2SO4,0 05%NP＿40,2 0mmol LMgCl2,0 1mmol L(each)dTNPs,20ng引物,20ng基因组DNA,1 5U的Taq酶。反应扩增程序为:94℃变性2min;扩增40个循环,每循环包括:94℃变性10s,40℃退火30s,72℃延伸1 5min;最终延伸5min。The optimal reaction system was constracted by studying the factors affecting the rice RAPD reaction.The system contained 10 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0), 10 mmol/L KCl, 8 mmol/L (NH_4)_2SO_4, 0.05% NP-40, 2.0 mmol/L MgCl_2, 0.1 mmol/L dTNPs for each nucleotide, 20 ng pirmers, 20 ng rice DNA, and 1.5 U Taq polymerase in total 25 μL. The process of reaction was 95 ℃ for 120 s in the beginning, then 94 ℃ for 10 s, 40 ℃ for 30 s, 72 ℃ for 90 s, for 40 cycles, 72 ℃ for 300 s in the end.

关 键 词：水稻 基因组DNA RAPD 反应系统 除草剂敏感致死 

分 类 号：S511[农业科学—作物学]