Nurr1基因的克隆及其在C17.2神经干细胞中的表达  

Cloning of Nurr1 gene and its expression in C17.2 neural stem cell

作　　者：刘卫国[1] 陈生弟[1] 李彪[1] 陈琰[1] 孙秀[1] 陆国强[1] 

机构地区：[1]上海第二医科大学附属瑞金医院神经科,帕金森病诊疗与研究中心,上海200025

出　　处：《中国神经科学杂志》2003年第3期142-145,共4页

基　　金：国家重点基础研究规划"脑功能和脑重大疾病的基础研究"(G19990 5 40 0 8) ;国家自然科学基金 ( 3 9970 2 63 ;3 0 1710 2 5 ) ;上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划 ( 97BR0 0 1);上海市科委"启明星后"计划 ( 97QMB14 10 )资助项目

摘　　要：目的 :通过克隆Nurr1基因并在神经干细胞中表达 ,探讨其对多巴胺能神经元生长、发育的影响 ,为治疗神经系统变性疾病 ,特别是帕金森病提供基因工程细胞。 方法 :采用RT PCR (reversetranscription polymerasechainreaction)方法获取Nurr1cDNA ,并克隆至pcDNA3.1 hygro载体中 ,经酶切及测序鉴定正确 ;再将Nurr1基因经Lipofectamine2 0 0 0转染 ,在C17.2神经干细胞中稳定表达。结果 :经反转录多聚酶链反应 (RT PCR)及WesternBlot印迹分析、鉴定Nurr1基因mRNA及蛋白表达正确。 结论 :Nurr1基因成功导入神经干细胞并表达 ,为实施基因工程细胞移植治疗PD奠定了基础。Objective:To explore the important role of Nurr1 gene in development and growth of dopaminergic neurons and provide gene engineered vector for the treatment of neurodegenerative diseases, especially Parkinson's disease. Methods:We cloned the human Nurr1 gene by RT PCR, subcloned it into pcDNA3.1 hygro, and identified the right clone by digestion of restriction enzyme and sequencing. Results:We stably transfected pcDNA3.1 hygro Nurr1 into C 17.2 neural stem cells with lipofectamine 2000, and identified the protein expression of Nurr1 gene by RT PCR and Western Blot. Conclusion:We successfully transfected Nurr1 gene into neural stem cell and express it ,which made a basis for treatment of PD with gene modified neural stem cell.

关 键 词：NURR1基因 基因克隆 C17.2神经干细胞 基因表达 帕金森病 

分 类 号：R742.5[医药卫生—神经病学与精神病学] R394[医药卫生—临床医学]