人线粒体tRNA^(Leu(UUR))基因A3243G点突变对其亮氨酰化活性的影响  

Effects of A3243G Point Mutation on Aminoacylation of Human Mitochondrial tRNA^(Leu(UUR))

作　　者：汪振诚[1] 王学敏[2] 金由辛[1] 缪明永[2] 韩伟国[1] 焦炳华[2] 

机构地区：[1]中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所 [2]第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海200433

出　　处：《遗传》2003年第4期383-387,共5页Hereditas（Beijing)

基　　金：中国科学院重要方向项目资助(批准号:KSCX-2-2-04);国家自然科学基金(30171030)

摘　　要：化学法合成人线粒体野生型与A3243G点突变型tRNA^(Leu(UUR))基因,体外转录生成相应的tRNA^(Leu(UUR)),表达并纯化人线粒体亮氨酰tRNA合成酶(mtLeuRS),用mtLeuRS催化野生型与突变型tRNA^(Leu(UUR))与亮氨酸结合,分别检测两种类型tRNA^(Leu(UUR))的氨酰化动力学常数。结果表明,野生型tRNA^(Leu(UUR))的K_m/K_(cat)仅为突变型tRNA^(Leu(UUR))的63.9％,A3243G点突变使tRNA^(Leu(UUR))接受亮氨酸的能力明显下降,提示此为A3243G点突变致病机制之一。The wild-type and mutant-type human mitochondrial tRNALeu(UUR) genes were synthesized and transcribed in vitro with T7 RNA polymerase. The kinetic parameters of human mitochondrial leucyl-tRNA synthetase (mtLeuRS) were determined with wild-type and mutant-type human mitochondrial tRNALeu(UUR) respectively. The results show that the value of Km/Kcat of mtLeuRS for the mutant-type tRNALeu(UUR) is 63. 9% as compared with the wild-type. Human mitochondrial tRNALeu(UUR) gene A3243G point mutant can remarkably reduce it's aminoacylation activity,suggesting it would be one of the mechanisms that the mutation could produce such clinical phenotypes.

关 键 词：人线粒体tRNA^Leu(UUR) 基因 点突变 氨酰化 

分 类 号：R346[医药卫生—基础医学]