虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)组蛋白H_3启动子的分子克隆及在稀有(鱼句)鲫(Gobiocypris rarus)中的表达活性分析  

作　　者：茅卫锋[1] 汪亚平[1] 孙永华[1] 吴刚[1] 陈尚萍[1] 朱作言[1] 

机构地区：[1]中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉430072

出　　处：《自然科学进展》2004年第1期46-50,共5页

基　　金：国家重点基础研究发展规划资助项目(批准号:G2000013109)

摘　　要：使用高保真PCR方法从虹鳟鱼基因组中克隆得到虹鳟鱼组蛋白H3启动子.将虹鳟鱼组蛋白H3启动子插入启动子缺失的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-1中,构建成重组载体pRH3EGFP-1.通过显微注射法得到转pRH3EGFP-1稀有(鱼句)鲫.在荧光解剖镜下,可以清楚地观察到EGFP在发育到原肠胚的转pRH3EGFP-1稀有(鱼句)鲫中表达.在稀有(鱼句)鲫幼体鱼苗中也可以清楚地观察到EGFP在多个组织中的泛组织表达.比较CMV启动子、鲤鱼β-actin启动子、虹鳟鱼组蛋白H3启动子的EGFP表达载体pCMVEGFP,pCAEGFP,pRH3EGFP-1在稀有(鱼句)鲫胚胎中的表达特性,结果表明pCMVEGFP最早表达,其后为pRH3EGFP-1和pCAEGFP,表达的强度依次为pCMVEGFP>pCAEGFP>pRH3EGFP-1.这说明虹鳟鱼组蛋白H3启动子可以作为一种有效的启动子,应用于鲤科鱼类(如稀有(鱼句)鲫)的转基因研究.

关 键 词：虹鳟鱼 组蛋白H3启动子 增强绿色荧光蛋白 转基因鱼 分子克隆 表达活性 

分 类 号：Q959.468[生物学—动物学] Q785