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作 者:苏小游[1] 段绍瑾[1] 陈宇霞[1] 潘健[1] 祁鑫[1]
机构地区:[1]中国中医研究院广安门医院艾滋病研究室,中国北京100053
出 处:《中华国际医学杂志》2003年第6期476-480,共5页
摘 要:目的 研究NO供体亚硝酰谷胱甘肽(GSNO)诱导胸腺细胞凋亡与p53表达的相互关系。方法 体外培养:BALB/C小鼠胸腺细胞,用地塞米松(DXM)作为阳性对照,再分别加不同剂量GSNO及NO抑制剂,孵育3h。用透射电镜观察胸腺细胞形态;用琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯型带纹;采用末端脱氧核酸转移酶(TdT)介导的末端标记在流式细胞仪上检测胸腺细胞凋亡;用RT-PCR的方法分析抑癌基因p53的表达在此过程中的变化及作用。结果胸腺细胞在无巯基S-77培养液中孵育可产生自然凋亡,用不同处理后在透射电镜下可见各组早、中、晚期不同阶段的凋亡细胞的形态,琼脂糖电泳显示DXM组出现较多中、晚期凋亡的胸腺细胞,有明显的DNA梯形条纹,加不同剂量的NO和NO抑制剂组则较弱,NO浓度愈高则梯形条纹愈不明显,0.3mmol/L和0.6mmol/L GSNO呈早中期凋亡形态学变化,1.2mmol/LGSNO主要呈早期改变;PCR结果同DNA电泳结果基本一致;流式细胞仪检测各组的凋亡率也有相同的趋势,各组之间差异有显著性。结论 胸腺细胞在无巯基培养液内孵育3h会产生自然凋亡,GSNO诱导胸腺细胞凋亡随浓度增加反而抑制胸腺细胞凋亡,NOS抑制剂可抑制凋亡,NO供体GSNO通过p53的表达来诱导细胞凋亡是NO引起细胞凋亡的可能机制之一。
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