一个链霉菌的质粒pHZ65及其载体的发展  

作　　者：邓子新 周秀芬 

机构地区：[1]华中农业大学农抗研究室,武汉430070

出　　处：《中国科学（B辑）》1992年第6期595-601,共7页Science in China(Series B)

基　　金：国家自然科学基金;国际科学基金(IFS)

摘　　要：FR-001和FR-005为农抗5102产生菌经原生质体融合后所产生的融合重组子,它们在形态及培养特征,抗菌活性及代谢产物方面均有明显差别。然而,它们则均含有一个DNA顺序同源,分子量大小均为20.1kb的质粒,命名为pHZ65。已用酶切分析法制做了这个质粒被限制内切酶BamHI,BclⅠ,BglⅡ,EcoRV,KpnⅠ,PstⅠ,SphⅠ,SstⅠ,XhoⅠ酶切共29个切点的详细图谱。在体外将携带了硫链丝菌素抗性基因tsr(可在链霉菌中表达)和氨苄青霉素抗性基因amp(可在大肠杆菌中表达)的大肠杆菌质粒pIJ2703插入到pHZ65的BclⅠ或BglⅠ位点,获得了4个既可转化链霉菌,又可转化大肠杆菌的双功能质粒pHZ200,pHZ201,pHZ206和pHZ207。将pHZ65的片段克隆到pIJ2703的BclⅠ位点所组建的一系列质粒在链霉菌中的复制能力揭示出pHZ65的必要复制功能区位于5个BglⅡ片段的2个连锁的片段(分别为4.44和0.52kb)之内。已从pHZ65衍生了一系列链霉菌——大肠杆菌的双功能载体。这类载体可以转化吸水链霉菌应城变种(FR-001和FR-005的融合亲本),而许多其它质粒载体则不能。

关 键 词：复制子 限制酶 链霉菌 质粒 pHZ65 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]