防龋用转基因番茄外源蛋白表达稳定性研究  

The Study of Expression Stability of Exogenous Gene in Transgenic Anti-Caries Tomatoes

作　　者：邹怡然 韩琪 白朋元[2,3] 管晓燕[2,3] 白国辉 田源[2,3] 陈筑 程磊[1] 刘建国 

机构地区：[1]四川大学口腔疾病国家重点实验室,四川成都 [2]遵义医学院,贵州遵义 [3]贵州省普通高等学校口腔疾病研究特色重点实验室暨遵义市口腔疾病研究重点实验室,贵州遵义 [4]遵义医学院附属贵阳口腔医院,贵州贵阳

出　　处：《临床医学进展》2018年第6期529-539,共11页Advances in Clinical Medicine

基　　金：国家自然科学基金项目《新型转基因植物防龋疫苗的研制及其口服免疫机制研究》(合同号:81260164);贵州省科技支撑计划项目《转基因番茄防龋疫苗高效表达和稳定性及安全性研究》(合同号:黔科合SY字(2012)3086号);贵州省普通高等学校口腔疾病研究特色重点实验室开放课题《口腔新型抗菌材料生物安全性研究》(课题号:SKLODR201701,课题本编号:K-025)。

摘　　要：目的:追踪检测转基因防龋可食番茄中外源蛋白的表达稳定性。方法:田间种植含有编码变异链球菌表面蛋白粘附功能A区(Cell surface protein antigen A, PAcA)、表面蛋白免疫活性P区(Cell surface pro-tein antigen P, PAcP)的外源基因pacA-ctxB、pacP-ctxB的转基因番茄种子,获得连续的四代番茄植株F0,F1,F2,F3。在植株的开花坐果期,每七天提取样本,通过生物分子技术检测外源蛋白的表达。结果:1) 四代转基因番茄中含嵌合基因pacA-ctxB的植株中有31株表达外源蛋白;含pacP-ctxB的植株中有28株表达。2) 果实中外源蛋白PAcA/CTB占总蛋白的含量是:F0代0.248%,F1代0.088%,F2代0.103%,F3代0.078%;PAcP/CTB的含量是:F0代0.308%,F1代0.300%,F2代0.278%,F3代0.176%。3) 在开花坐果期的第6~8周,果实中外源蛋白PAcA/CTB含量分别为0.236%,0.276%,0.257%;PAcP/CTB为0.568%,0.600%,0.554%。结论:防龋疫苗中外源蛋白能够较稳定地表达,表达含量较高;PAcP/CTB的表达阳性率及含量均较PAcA/CTB高;外源蛋白在果实中的表达较叶片高;外源蛋白在坐果期的6~8周的表达最高;同株的不同果实同期表达含量及比重有差异。

关 键 词：变异链球菌 表面蛋白唾液黏附区 转基因番茄 表达稳定性 防龋疫苗 

分 类 号：R73[医药卫生—肿瘤]