国家教育部博士点基金(20102325110004)

作品数：11被引量：18H指数：3
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鸭肠炎病毒gB N端(60～110aa)抗原优势区的原核表达及抗血清的制备
《中国兽医科学》2015年第9期888-895,共8页曹春秋 张树栋 刘琪 董井泉 高明春 张文龙 许丽 于长泳 马波 王君伟 
2013年度黑龙江省博士后资助项目(LBH-Z13021);高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20102325110004);东北农业大学大学生创新创业训练项目(2013029)
以本实验室已克隆的鸭肠炎病毒（DEV）C-KCE株ul27基因序列为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得编码鸭肠炎病毒gB N端第60～110aa的目的基因片段,大小为150bp。将目的基因亚克隆至原核表达载体pET-32a（＋）中,阳性质粒被命名为pET-32a...
关键词：鸭肠炎病毒 GB 原核表达 抗血清 
鸭肠炎病毒C-KCE株TK基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：3
《黑龙江畜牧兽医》2015年第5期154-157,269,共5页赵宇 田荔 母晓宇 董井泉 高明春 张文龙 马波 王君伟 
高等学校博士学科点专项科研基金项目(20102325110004);东北农业大学博士启动基金项目
为了探究鸭肠炎病毒(DEV)TK基因编码蛋白在相关细胞上作用与功能及其在病毒感染周期、机体免疫应答中的作用,试验以DEV C-KCE株基因组DNA为模板扩增获得TK基因,在p ET-32a(+)/Rosetta(DE3)p Lys系统中原核表达,并用IPTG诱导DEV TK重组...
关键词：鸭肠炎病毒(DEV) TK基因 原核表达 多克隆抗体 WESTERN-BLOT 间接免疫荧光试验 
鸭肠炎病毒gB抗原优势区的表达及其多克隆抗体的反应特性被引量：4
《畜牧兽医学报》2015年第3期430-437,共8页张树栋 曹春秋 董井泉 高明春 张文龙 郑铁鑫 马波 王君伟 
2013年度黑龙江省博士后资助项目(LBH-Z13021);高等学校博士学科点专项科研基金资助课题(20102325110004)
拟制备鸭肠炎病毒(DEV)gB抗原优势区的多克隆抗体,初步应用于该病毒的检测。以本实验室克隆的DEVC-KCE株ul27基因序列为参考序列设计特异性引物,通过PCR获得DEV gB优势表位区域基因片段gB-AD(331—570bp),并在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pL...
关键词：鸭肠炎病毒 GB 抗原优势区 原核表达 多克隆抗体 检测 
Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1蛋白优势抗原区的鉴定及抗体检测ELISA方法的建立被引量：6
《中国预防兽医学报》2014年第7期542-546,共5页董井泉 张蕾 马波 师东方 王君伟 
黑龙江省"十二五"科技攻关项目(GA09B302);高校博士学科点专项基金(20102325110004);黑龙江省青年基金(QC04C32)
为鉴定Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)VP1蛋白优势抗原区及建立DHV-Ⅰ抗体检测ELISA方法,本研究以重组质粒pEasy-VP1为模板,将其分为5段(VP1-a^e)及全长VP1经PCR扩增,并分别克隆于pET-32a(+)进行原核表达。经western blot分析表明,截短表达的蛋...
关键词：鸭肝炎病毒 VP1蛋白 抗原优势区 间接ELISA 
东北白鹅CD4基因的克隆及其胞外区的表达与抗血清的制备被引量：4
《畜牧兽医学报》2014年第4期639-646,共8页张雪莲 魏双施 邵建伟 母晓宇 高明春 张文龙 马波 王君伟 
黑龙江省"十二五"科技攻关项目(GA09B302);高校博士学科点专项基金(20102325110004);黑龙江省青年基金(QC04C32)
本研究根据GenBank公布的绿头鸭CD4(AF378701)基因序列设计引物,RT-PCR获得东北白鹅CD4基因。根据测序结果设计特异性引物,克隆得到东北白鹅CD4胞外区基因,并在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白获...
关键词：东北白鹅 CD4 基因表达 T淋巴细胞 
鹅IgA重链恒定区的原核表达及其多克隆抗体的制备
《黑龙江畜牧兽医》2013年第12期107-110,共4页盛巧玲 郭永丽 魏双施 王璞 高明春 王君伟 
高等学校博士学科点专项科研基金项目(201023251 10004)
为了研究鹅免疫球蛋白的生物学功能,试验采用PCR技术,参考鹅IgA重链恒定区(F)基因序列设计引物,扩增出F基因,构建了含有F基因的重组原核表达质粒pET-28a-GoIgA-C,目的基因为1 339 bp,再进行IPTG诱导表达、ELISA检测和Western-blot分析...
关键词：鹅IgA重链恒定区 基因 原核表达 多克隆抗体 
鸭肝炎病毒在鸭胚成纤维细胞上的适应性研究
《中国家禽》2013年第4期14-16,共3页李鑫 朱永梅 母晓宇 马波 王君伟 
高等学校博士学科点专项科研基金(20102325110004)
将鸭肝炎病毒(DHV)E53鸡胚致弱株适应鸭胚成纤维细胞(DEF),连续传代至第16代时出现细胞病变(CPE),第21代时CPE呈现规律性,接毒后72hCPE达80%,其病变特征是细胞间隙增宽、细胞崩解死亡、脱落。经病毒细胞培养物滴度测定、RT-PCR检测和间...
关键词：鸭肝炎病毒 鸭胚成纤维细胞 适应 
鸭肠炎病毒US10基因的原核表达及抗血清的制备
《吉林农业大学学报》2013年第1期58-62,71,共6页张蕾 董井泉 母晓宇 马波 王君伟 
高等学校博士学科点专项科研基金资助课题(20102325110004);东北农业大学博士启动基金项目(2009)
以鸭肠炎病毒(DEV)C-KCE株基因组DNA为模板,PCR扩增获得US10基因。构建了其原核表达载体pET-32a-US10,经1.0 mmol/L IPTG诱导,目的蛋白在Rosetta(DE3)pLys宿主菌中获得了表达。SDS-PAGE电泳结果显示目的蛋白以包涵体形式表达,与预期大...
关键词：鸭肠炎病毒 US10基因 表达 
鸭肠炎病毒SORF3基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：1
《中国家禽》2012年第23期14-17,共4页母晓宇 董井泉 孟祥莉 张雪莲 马波 王君伟 
高等学校博士学科点专项科研基金(20102325110004);东北农业大学博士启动基金
以鸭肠炎病毒(DEV)C-KCE株基因组DNA为模板,PCR扩增获得SORF3(S3)基因,在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLys系统中原核表达。S3重组蛋白经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示外源基因以包涵体形式表达为主,分子质量约为52ku。重组蛋白经Ni-NTA纯化后...
关键词：鸭肠炎病毒 SORF3基因 原核表达 
鸭减蛋综合征抗体消长规律初步研究
《中国家禽》2012年第15期59-60,共2页王晓东 于志丹 李鑫 马波 王君伟 
高等学校博士学科点专项科研基金资助课题(20102325110004);黑龙江省科技攻关项目(GB01B503-02;GB04B504);东北农业大学博士启动基金
减蛋综合征（Egg drop syndrome,EDS-76）是由减蛋综合征病毒（EDSV）引起的一种以产蛋鸡产薄壳或无壳蛋,产蛋率严重下降为主要特征的传染病。减蛋综合征病毒又称鸭腺病毒,一些研究表明,尽管发生疾病都是在产蛋鸡,但鸭才是EDSV的天然贮...
关键词：减蛋综合征病毒 抗体消长规律 鸭 发生疾病 EDSV 产蛋鸡 无壳蛋 传染病 
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