黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11541019)

作品数:6被引量:19H指数:3
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相关作者:葛俊伟李一经赵丽丽刘敏刘巍巍更多>>
相关机构:东北农业大学深圳出入境检验检疫局更多>>
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传染性胰腺坏死病毒VP2 COE蛋白单克隆抗体的制备与初步应用被引量:9
《水产学报》2013年第8期1229-1235,共7页连科迅 赵丽丽 张琳琳 贾鹏 唐立杰 葛俊伟 李一经 刘敏 
国家科技支撑计划(2012BAD25B02);黑龙江省教育厅科技项目(11541019)
为制备抗IPNV VP2蛋白的单克隆抗体,对其基本特性进行鉴定并进行初步应用。实验利用Ni-NTA亲和层析纯化的IPNV VP2 COE重组蛋白作为免疫原,免疫8周龄的雌性BALB/c小鼠,经3次免疫后,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合。采用间接EL...
关键词:传染性胰腺坏死病毒 VP2重组蛋白 单克隆抗体 
抗传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备被引量:2
《淡水渔业》2013年第3期56-60,共5页刘立月 刘巍巍 赵丽丽 葛俊伟 唐立杰 刘敏 李一经 
国家科技支撑计划(2012BAD25B02);黑龙江省教育厅科技项目(11541019)
利用纯化后的传染性胰腺坏死病毒(IPNV VP3)重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,利用染色体鉴定、蛋白印迹和免疫荧光等方法对单克隆抗体进行鉴定,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性...
关键词:传染性胰腺坏死病毒 VP3蛋白 单克隆抗体 
传染性胰腺坏死病病毒分离株VP2基因抗原表位区融合表达及免疫特性的分析被引量:5
《水产学报》2012年第11期1770-1775,共6页王健楠 赵丽丽 刘立月 连科迅 李一经 葛俊伟 刘敏 
国家科技支撑计划(2012BAD25B02);黑龙江省教育厅科技项目(11541019)
利用RT-PCR方法扩增出IPNV-ZYX分离株主要结构蛋白VP2的抗原表位区基因(616bp),命名为IPNV VP2 COE,将其克隆到pCold TF表达载体中构建重组质粒pCold TF-VP2COE,在大肠杆菌BL21(DH5α)感受态表达,经SDS-PAGE电泳分析,表达蛋白约78 ku,...
关键词:IPNV-ZYX分离株 VP2 COE蛋白 原核表达 免疫特性 
传染性造血组织坏死病毒糖蛋白基因的原核表达及抗原性分析
《东北农业大学学报》2011年第12期81-85,共5页赵永欣 赵丽丽 刘巍巍 王健楠 李一经 乔薪瑗 葛俊伟 刘敏 
黑龙江省自然科学基金(C200837);黑龙江省教育厅科技项目(11541019)
应用RT-PCR方法扩增了传染性造血组织坏死病毒IHNV-ZYX株编码的糖蛋白(G)基因,将G基因克隆至原核表达载体pET30b,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中得到了表达。SDS-PAGE分析表明,重组菌诱导后得到了预期大小的G蛋白。提取G蛋白的包涵体,并制...
关键词:传染性造血组织坏死病毒 G基因 克隆表达 抗血清 
传染性造血组织坏死病毒核衣壳蛋白的原核表达及抗原性分析被引量:5
《淡水渔业》2011年第5期40-44,共5页赵永欣 赵丽丽 刘巍巍 王建楠 李一经 乔薪瑗 葛俊伟 刘敏 
黑龙江省自然科学基金(C200837);黑龙江省教育厅科技项目(11541019)
应用RT-PCR方法扩增了长度为1176 bp的IHNV-ZYX株编码核衣壳(N)蛋白基因,将N基因克隆至原核表达载体pET30b,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中得到了表达。通过SDS-PAGE分析表明,重组菌诱导后得到了预期大小约48 KD的N蛋白,与理论值相符;提取...
关键词:传染性造血组织坏死病毒 N基因 原核表达 抗血清 
传染性胰腺坏死病毒VP3基因的分段表达及其抗原表位区域分析被引量:3
《淡水渔业》2011年第4期61-65,共5页刘巍巍 赵丽丽 赵永欣 王健楠 李一经 葛俊伟 乔薪瑗 刘敏 
黑龙江省自然科学基金(C200837);黑龙江省教育厅科技项目(11541019)
采用PCR方法克隆了传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3四段相互重叠的基因片段L1、L2、L3和L4,将PCR产物分别连接到原核表达载体pGEX-6P1和pET32a上,经酶切、PCR、测序鉴定,获得重组质粒pGEX-6P1-VP3(L1)、pET32a-VP3(L2)、pGEX-6P1-VP3...
关键词:传染性胰腺坏死病毒 VP3基因 原核表达 抗原表位 
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