国家高技术研究发展计划(2005AA246020)

作品数：6被引量：18H指数：2
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相关作者：张泉朱鸿飞孙怀昌袁维峰于可响更多>>
相关机构：扬州大学中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院更多>>
相关期刊：《高技术通讯》《中国兽医学报》《中国农业科学》《中国生物工程杂志》更多>>
相关主题：质粒DNA安全性内毒素动物转染效率更多>>
相关领域：生物学农业科学更多>>
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动物用质粒DNA内毒素去除方法的建立及其质量检验被引量：7
《中国兽医学报》2009年第1期63-66,96,共5页张泉 袁燕 袁维峰 孙怀昌 朱鸿飞 
国家863发展项目(2005AA246020)
用自行改进设计的TritonX-114方法去除动物用重组质粒DNA中的内毒素,鲎试剂检测方法确定每毫克质粒DNA中内毒素的含量为50 EU。将3种不同方法制备的重组质粒pEGFPN1包裹后转染COS-7、MDCK和Marc145细胞,结果表明,经TritonX-114去除内毒...
关键词：TritonX-114 内毒素 转染效率 表达 安全性 
CTAB选择性沉淀和纯化质粒DNA工艺的建立被引量：2
《生物工程学报》2008年第12期2117-2121,共5页张泉 于可响 袁维峰 薛方明 孙怀昌 朱鸿飞 
国家高技术研究发展项目(No.2005AA246020);国家科技攻关项目(No.2004BA519A75-1)资助~~
通过直接在大肠杆菌碱裂解上清中加入十六烷基三甲基溴化铵（CTAB），优化CTAB与质粒DNA量的比例、质粒DNA选择性释放溶液的选择和TritonX－114的使用，建立了简单、易行的大规模质粒DNA纯化工艺。纯化质粒DNA的质量检测结果显示，CTAB...
关键词：十六烷基三甲基溴化铵 质粒DNA 纯化 质量检测 
重组大肠杆菌碱裂解方法的改进被引量：2
《中国生物工程杂志》2007年第2期76-79,共4页张泉 朱鸿飞 于可响 薛方明 孙怀昌 
国家"863"计划资助项目(2005AA246020)
为了降低质粒DNA的生产成本,对经典碱裂解法中的溶液III进行了改进,以表达溶菌酶基因的pcDNKLYZ重组质粒转化的大肠杆菌DH5α为指示菌,用标准碱裂解和改进碱裂解法提取质粒pcDNKLYZ,以提取的质粒产量和质量为指标,判断优化碱性裂解法的...
关键词：重组大肠杆菌 碱裂解法 
用于质粒DNA规模化生产的大肠杆菌发酵培养基的筛选被引量：5
《中国生物工程杂志》2007年第1期102-105,共4页张泉 郭晓宇 袁维峰 孙怀昌 朱鸿飞 
国家"863"计划资助项目(2005AA246020)
为降低质粒DNA的生产成本,在标准LB培养基的基础上,利用国产试剂配制成10种大肠杆菌液体培养基,以pEGFPC3、pcDNAlacZ和pcDNKLYZ质粒转化的JM109和DH5α大肠杆菌为指示菌进行小规模发酵培养,定时采样测量OD600值及质粒产量,获得一种高...
关键词：质粒DNA 细菌培养基 产量 
重组质粒pcDNKCpG在动物体内分布、残留及水平传播检测被引量：1
《高技术通讯》2006年第6期629-632,共4页张泉 于可响 严彩红 郭晓宇 孙怀昌 朱鸿飞 
863计划（2003AA243070和2005AA246020）资助项目.
通过肌肉注射的途径将重组质粒pcDNKCpG导入到鸡和猪体内，提取不同时间段的动物组织DNA，特异性的PCR扩增结果提示重组质粒pcDNKCpG主要分布在鸡和猪的血液和注射部位肌肉中，残留时间分别不超过16天和8天；凝胶电泳回收的组织DNA经过...
关键词：分布 残留 PCR Southem杂交 生物安全 
牛胰腺核糖核酸酶A的基因克隆、表达及初步鉴定被引量：1
《中国农业科学》2006年第6期1248-1252,共5页张泉 袁燕 朱鸿飞 张鑫宇 孙怀昌 
国家"863"项目(2005AA246020)
目的为了避免在制备基因治疗或基因免疫的质粒时使用动物源性的核糖核酸酶A(RNaseA)。方法提取牛胰腺总RNA,利用RT-PCR扩增出牛核糖核酸酶AcDNA,RT-PCR产物克隆到pGEM-T载体测序验证后,将此cDNA亚克隆到大肠杆菌分泌型表达载体pEZZ18中...
关键词：RNASE A 克隆 表达 鉴定 
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