国家自然科学基金(30872417)

作品数：10被引量：25H指数：3
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重组腺病毒Ad5-hNK4-EGFP的构建与鉴定被引量：3
《中国生物制品学杂志》2012年第6期676-681,共6页匡文斌 成凤 秦晓林 范晓卿 王秦 董晋豫 梁勤东 涂植光 
国家自然科学基金(30872417)
目的构建携带绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)标签和hNK4基因的重组腺病毒Ad5-hNK4-EGFP,并检测其对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响。方法以pcDNA3/hNK4质粒为模板,采用高保真DNA聚合酶扩增hNK4基因,克隆至腺...
关键词：腺病毒 肝细胞生长因子 NK4 乳腺癌 基因治疗 
Y盒结合蛋白1单克隆抗体的研制、表位测定及其免疫学应用被引量：5
《中国生物工程杂志》2012年第6期13-19,共7页李朴 史静 成凤 梁勤东 匡文斌 王秦 董晋豫 涂植光 
国家自然科学基金资助项目(30872417)
建立稳定分泌抗人Y盒结合蛋白1单克隆抗体(anti-YB-1 mAb)的杂交瘤细胞株,鉴定其表位与免疫学应用。将重组YB-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合。经ELISA法筛选鉴定、定株后采用腹水诱生法制备anti-YB-1 mAb;Protein ...
关键词：YB-1 单克隆抗体 抗原表位 免疫学检测 
hPSF蛋白的原核表达质粒的构建及分析鉴定
《海南医学院学报》2012年第10期1353-1356,共4页夏乾峰 李灵 
国家自然科学基金资助项目(30872417)~~
目的:构建hPSF蛋白原核表达质粒,在体外观察其与GAGE6调控区结合现象。方法:从人成纤维细胞中提取总RNA,利用hPSF特异性引物通过RT-PCR方法扩增hPSF cDNA编码序列,克隆入pET-28a载体中,构建重组载体pET-28-hPSF。将重组质粒转化入大肠...
关键词：PSF蛋白 肿瘤 原核表达 
Y-盒结合蛋白-1基因对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖、凋亡及侵袭能力的影响被引量：2
《中国生物制品学杂志》2012年第3期314-317,323,共5页邱欣欣 涂植光 孔飞飞 陈光辉 成凤 匡文斌 钟梁 
国家自然科学基金(30872417)
目的观察Y-盒结合蛋白-1(Y-box binding protein-1,YB-1)基因对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法通过脂质体介导的方法将YB-1 shRNA重组质粒pGSi2和阴性对照质粒HK转染MDA-MB-231细胞,采用RT-PCR和Western blo...
关键词：Y-盒结合蛋白-1基因 RNA干扰 乳腺癌 细胞增殖 细胞凋亡 侵袭 基质金属蛋白酶类 
靶向Y-box结合蛋白-1基因的shRNA质粒的构建及鉴定被引量：2
《中国生物制品学杂志》2011年第12期1413-1416,共4页邱欣欣 涂植光 孔飞飞 陈光辉 匡文斌 成凤 钟梁 
国家自然科学基金(30872417)
目的构建靶向Y-box结合蛋白-1(Y-box binding protein-1,YB-1)基因的短发夹RNA(shRNA)表达质粒并鉴定其抑制率。方法设计并合成3对针对YB-1基因的shRNA链,退火形成双链,与酶切的质粒pGenesil-1连接,构建3个重组质粒pGSi1、pGSi2和pGSi3...
关键词：YB-1基因 RNA干扰 乳腺肿瘤 
新型二聚体突变荧光引物定量PCR方法的建立及其在检测HCV中的应用被引量：3
《中华检验医学杂志》2011年第8期735-738,共4页夏乾峰 文阳安 刘靳波 李朴 涂植光 
国家自然科学基金资助项目（30872417）;海南省教育厅高校科学研究项目（Hj2010-20）
目的开发新型二聚体突变荧光引物技术，建立一种能广泛应用于临床检测HCV的实时PCR方法。方法构建重组质粒pMD18-T—HCV5’NCR作为标准品，设计二聚体突变荧光引物，优化定量PCR体系，并进行方法学评价。将本法应用于临床确诊的30份HCV...
关键词：肝炎病毒属 聚合酶链反应 RNA 病毒 
人YB-1的高效原核表达及其标准蛋白与抗血清的制备被引量：1
《激光杂志》2011年第5期67-69,共3页李朴 史静 郭变琴 钟梁 梁勤东 涂植光 
国家自然科学基金资助项目(30872417)
目的:构建YB1-GST表达系统,建立经济高效YB-1蛋白制备方法并制备其多抗。方法:将YB-1编码序列亚克隆至表达载体pGEX-6P-1;转化表达菌并确定可溶性表达最佳条件;采用GST亲和层析与层析柱上PSP酶切融合蛋白获取无标签蛋白的YB-1,经超滤浓...
关键词：YB-1 GST亲和层析 柱上酶切 多抗制备 
靶向YB-1的microRNA表达载体的构建及其对MB-MDA-231细胞增殖的影响被引量：1
《激光杂志》2011年第4期67-69,共3页孔飞飞 邱欣欣 陈光辉 钟梁 周义文 成风 匡文斌 涂植光 
国家自然科学基金(30872417)
目的:构建靶向YB-1基因的microRNA表达载体,研究其对乳腺癌细胞MB-MDA231增殖的影响。方法:采用microRNA靶基因预测软件预测可能作用于YB-1基因的micro RNA,构建其过表达载体,利用Lipofectamine2000转染细胞MB-MDA231,荧光显微镜下评估...
关键词：microRNA137 MB-MDA231细胞 YB-1 增殖 
新型二聚体突变荧光引物定量检测沙眼衣原体被引量：1
《临床检验杂志》2011年第4期241-243,共3页夏乾峰 覃西 钱士匀 涂植光 
国家自然科学基金资助项目(30872417);海南省教育厅高校科学研究项目(Hj2010-20)
目的以二聚体突变荧光引物技术为基础建立对沙眼衣原体进行定量检测的新方法。方法以沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因构建重组质粒作为DNA标准品,设计二聚体突变荧光引物,优化定量PCR体系并进行性能评价;同时对148例临床生殖道标本进...
关键词：沙眼衣原体 实时定量PCR 二聚体突变荧光引物 
人YB-1蛋白的高效原核表达、纯化及其多抗的制备被引量：10
《第三军医大学学报》2010年第14期1579-1581,共3页李朴 孔飞飞 余雪梅 成凤 涂植光 
国家自然科学基金(30872417)
目的构建YB-1原核表达系统,诱导表达后纯化YB-1融合蛋白并制备其多抗。方法采用RT-PCR扩增YB-1编码序列,将该序列克隆至载体pET-32a(+);转化BL21(DE3),确定最佳表达条件;采用亲和层析与超滤纯化目的蛋白,经Western blot鉴定后免疫家兔,...
关键词：YB-1 原核表达 亲和层析 多抗制备 
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