云南省教育厅科学研究基金(2010Y398)

作品数:16被引量:28H指数:3
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相关机构:昆明理工大学成都军区昆明总医院昆明学院孝感市中心医院更多>>
相关期刊:《生物化学与生物物理进展》《生物技术通报》《吉林大学学报(医学版)》《生命科学研究》更多>>
相关主题:乳酸乳球菌甲型副伤寒沙门菌生物学特性纯化噬菌体更多>>
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宿主菌抗噬菌体机制的研究进展被引量:4
《病毒学报》2015年第4期474-479,共6页毛普加 曾韦锟 洪愉 冯梦蝶 许泽仰 
云南省教育厅科学研究基金项目(2010Y398);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055;2012FB135);国家自然科学基金项目(31160193)
噬菌体又称细菌病毒,是公认最丰富的微生物,也是最多样性的,这种多样性是适应所面对选择性压力例如普遍存在宿主菌的噬菌体抗性机制。噬菌体通过6步(吸附、注入、复制、转录翻译、组装和释放)侵入细菌并使之裂解,但是当噬菌体感染细菌,...
关键词:宿主菌 噬菌体 抗性机制 
F_(212-489)-3LysM融合蛋白与乳酸乳球菌的体外混合展示
《生命科学研究》2015年第4期328-332,共5页许泽仰 洪愉 冯梦蝶 毛普加 赵继华 杨洪文 宋武战 黄芬 井申荣 曾韦锟 
云南省教育厅科学研究基金项目(2010Y398);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055;2012FB135);国家自然科学基金项目(31160193)
探索C端融合有锚定序列3Lys M的呼吸道合胞病毒F截短蛋白(F212-489),能否通过体外混合展示于乳酸乳球菌MG1363表面。采用PCR方法扩增f212-489及3lys M基因,分别亚克隆至p MD18-T载体,在亚克隆载体中酶切回收上述两片段,插入p ET28a构成p...
关键词:乳酸乳球菌 表面展示 呼吸道合胞病毒 F蛋白 
甲型副伤寒沙门菌PagC蛋白在乳酸乳球菌中的表达研究
《中国微生态学杂志》2015年第7期753-756,760,共5页许泽仰 洪愉 贾静 冯梦蝶 毛普加 赵继华 杨洪文 宋武战 王纪爱 黄芬 井申荣 曾韦锟 
云南省教育厅科学研究基金项目(2010Y398);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055;2012FB135);国家自然科学基金项目(31160193)
目的构建能够表达甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白(Pag C)的乳酸乳球菌。方法 PCR扩增pag C基因,亚克隆至p MD18-T载体并测序,从亚克隆载体中酶切回收pag C基因,插入p MG36e并命名为p MG36e-pag C,转化乳酸乳球菌MG1363。溶菌酶加超声的方法...
关键词:乳酸乳球菌 黏膜免疫 PagC Western BLOT 
LSPA1早期基因gp22细菌双杂交诱饵载体与筛选文库的建立
《生物技术通报》2015年第7期214-219,共6页冯梦蝶 毛普加 洪愉 许泽仰 赵继华 杨洪文 宋武战 黄芬 井申荣 曾韦锟 
国家自然科学基金项目(31160193);云南省教育厅科学研究基金项目(2010Y398);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055;2012FB135)
构建细菌双杂交系统中的诱饵载体p KT25-gp22和甲型副伤寒沙门氏菌基因文库以便后续的筛选实验。PCR扩增获得gp22基因,插入p KT25构成诱饵质粒p KT25-gp22。提取甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA,经Sau3AⅠ部分酶切后连接到p UT18C质粒的Ba...
关键词:细菌双杂交 诱饵载体 基因组文库 早期基因 甲型副伤寒沙门氏菌 
甲型副伤寒杆菌抗噬菌体及生物膜形成基因的筛选及鉴定被引量:2
《生物化学与生物物理进展》2015年第6期583-588,共6页毛普加 冯梦蝶 洪愉 许泽仰 赵继华 杨洪文 宋武战 黄芬 井申荣 曾韦锟 
云南省教育厅科学研究基金资助项目(2010Y398);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055,2012FB135);国家自然科学基金资助项目(31160193)~~
细菌生物膜(bacterial biofilm,BF)与大部分的细菌感染相关,有助于病原菌抵抗外部不利的环境,包括抗生素和抗噬菌体等.为了研究生物膜和抗噬菌体的作用机制,本文以6株抗噬菌体甲型副伤寒杆菌(副甲菌)突变菌作为研究对象,在Rif+(利福平)(...
关键词:甲型副伤寒沙门菌 转座 抗噬菌体 生物膜 
抗噬菌体甲型副伤寒沙门菌突变菌的构建及其生物学特性被引量:2
《吉林大学学报(医学版)》2015年第2期275-281,共7页毛普加 冯梦蝶 洪愉 毛小萍 许泽仰 赵继华 杨洪文 宋武战 黄芬 井申荣 曾韦锟 
国家自然科学基金资助课题(31160193);云南省教育厅科研项目资助课题(2010Y398);云南省科技厅应用基础研究面上项目资助课题(2010ZC055;2012FB135)
目的:采用同源重组基因敲除方法构建3株甲型副伤寒沙门菌(副甲)抗噬菌体突变菌,并研究其生物学特性。方法:通过PCR和融合PCR方法获得了2、3、5号同源臂片段,经酶切后与pYG4载体连接,构建pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重组质粒。经PCR测序...
关键词:甲型副伤寒沙门菌 突变菌 同源重组 生物学特性 噬菌体抗性 
乳酸乳球菌组成型表面展示载体的构建及鉴定被引量:2
《中国微生态学杂志》2015年第1期1-5,共5页冯梦蝶 毛普加 洪愉 毛小萍 许泽仰 宋武战 杨洪文 赵继华 黄芬 井申荣 曾韦锟 
国家自然科学基金(31160193);云南省教育厅科学研究基金(2010Y398);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055;2012FB135)
目的探索融合有Usp45信号肽和3Lys M锚定序列的EGFP蛋白能否通过p32启动子组成型展示于乳酸乳球菌MG1363表面。方法融合PCR法分别将p32启动子与Usp45信号肽、3Lys M与egfp基因融合亚克隆至p MD-18T载体,鉴定正确后命名为18T-p Usp45、18...
关键词:乳酸乳球菌 表面展示 锚定 组成型表达 
CAT为报告基因的铜绿假单胞菌启动子文库的建立及初步鉴定被引量:3
《生命科学研究》2014年第6期521-526,共6页冯梦蝶 洪愉 许泽仰 毛普加 冯金 赵继华 杨洪文 宋武战 黄芬 井申荣 曾韦锟 
国家自然科学基金项目(31160193);云南省教育厅科学研究基金项目(2010Y398);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055;2012FB135)
以CAT(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)为报告基因,构建p CAT2启动子探针载体从绿脓杆菌基因文库中筛选启动子。Sau3AⅠ酶切铜绿假单胞菌的基因组,回收(500-1 500 bp)片段并与p CAT2载体连接构建铜绿假单胞菌的基因组文库,...
关键词:氯霉素乙酰转移酶(CAT) 报告基因 铜绿假单胞菌(PA) 启动子文库 
基于Profinity eXact系统的可溶性egfp表达和纯化被引量:2
《生命科学研究》2014年第4期310-314,共5页冯金 洪愉 黄芬 井申荣 曾韦锟 
国家自然科学基金资助项目(31160193);云南省教育厅科学研究基金资助项目(2010Y398);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055;2012FB135)
为研究Profinity eXact系统在蛋白表达及纯化过程中的效果,利用PCR扩增绿色荧光蛋白基因egfp,定向克隆至表达载体pPAL7上,转化BL21(DE3),荧光显微镜下观察诱导后的重组菌;取超声破碎的上清挂柱纯化,紫外下检测纯化后egfp发出荧光的特性,...
关键词:纯化 Profinity eXact系统 egfp蛋白 原核表达 
组成型表达人呼吸道合胞病毒F_(212-489)蛋白乳酸乳球菌的构建被引量:3
《第三军医大学学报》2014年第13期1354-1358,共5页冯金 洪愉 毛普加 黄芬 井申荣 曾韦锟 
国家自然科学基金(31160193);云南省教育厅科学研究基金(2010Y398);云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055;2012FB135)~~
目的构建能表达呼吸道合胞病毒截短F1蛋白(F212-489)的乳酸乳球菌,并检测表达蛋白的免疫反应性,以评估此重组菌作为口服活菌疫苗的可行性。方法 PCR扩增绿色荧光基因egfp以及截短f1基因(f212-489),经TA克隆测序后,将目的片段构建至pMG36...
关键词:人类呼吸道合胞病毒 F蛋白 乳酸乳球菌 
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