实时荧光定量PCR检测

作品数：510被引量：1804H指数：15
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鸭腺病毒3型SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
《中国兽医学报》2024年第3期472-476,498,共6页赵自亮 庄鸿琨 黄忍 朱桓奕 程钟坤 冯旭东 王迎平 倪兴维 徐婷婷 刘霞 杨晓伟 赵光伟 
贵州省科技支撑资助项目(黔科合支撑2023一般022);鲁渝科技协作资助项目。
为建立鸭腺病毒3型(duck adenovirus 3,DAdV-3)一种基于SYBR Green I染料的荧光定量PCR诊断方法,本试验根据DAdV-3基因组序列中相对保守的Fiber-2基因,通过普通PCR扩增,构建pMD19-Fiber2重组质粒为阳性标准品,在此基础上设计合成特异性...
关键词：鸭腺病毒病毒3型 Fiber-2基因 实时荧光定量PCR 
SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测猪细小病毒方法的建立及初步应用被引量：13
《中国兽医学报》2011年第1期11-15,共5页沈志强 王金良 郭显坡 王晓虎 汪明 赵德明 
根据GenBank登录的猪细小病毒株NADL-2(NC001718)的VP2基因序列设计1对特异性引物,经PCR扩增出431bp的目的片段。回收产物与pMD18-T vector连接后转化到基因工程菌DH5α中,提取重组质粒,经PCR及测序鉴定后,作为标准模板建立SYBR Green...
关键词：猪细小病毒 实时荧光定量PCR 检测 
实时荧光定量PCR检测伪狂犬病病毒方法的建立与初步应用被引量：9
《中国兽医学报》2009年第4期433-436,共4页赵丽 崔保安 陈红英 魏战勇 郑兰兰 吕晓丽 文英会 
河南省杰出人才创新基金资助项目(0621002100)
根据GenBank中猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的序列(EF552427),利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针,从猪伪狂犬病病毒(PRV)感染的细胞中提取DNA,进行PCR扩增。将鉴定正确的gE基因片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化大...
关键词：伪狂犬病病毒 荧光定量PCR 检测 
SYBR Green实时荧光定量PCR检测水牛体细胞组蛋白乙酰化相关基因mRNA表达被引量：8
《中国兽医学报》2009年第2期233-237,共5页罗婵 王志强 公方强 石德顺 
国家自然科学基金资助项目(30460090);国家"863"计划资助项目(2005AA206130)
以检测水牛成纤维细胞中组蛋白乙酰转移酶(HAT1)和脱乙酰化酶(HDAC1)转录活性为例,对SYBRGreen实时荧光定量PCR技术平台的建立进行了探讨。结果显示,适宜的引物,高质量RNA反转录得到的cDNA以及合适的PCR体系为SYBR Green实时荧光定量PC...
关键词：实时荧光定量PCR 组蛋白乙酰化/去乙酰化 mRNA表达水平检测 
实时荧光定量PCR检测猪细小病毒被引量：6
《中国兽医学报》2008年第10期1118-1121,共4页李小康 崔保安 陈红英 魏战勇 郑兰兰 赵丽 吕晓丽 
国家"十五"食品安全重大攻关专项基金资助项目(2001BA804A30-11)
根据已报道的猪细小病毒基因组序列,设计并合成了引物和探针,从猪细小病毒(PPV)感染的细胞中提取DNA,经PCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌JM109,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行PCR和测序鉴定,表明目的...
关键词：猪细小病毒 实时荧光定量PCR 标准曲线 
禽网状内皮组织增殖病病毒的实时荧光定量PCR检测被引量：4
《中国兽医学报》2007年第6期795-798,共4页赵丽青 王树峰 吴延功 王志亮 
农业部"948"基金资助项目(982070)
基于Light Cycler平台,利用SYBR GreenI染料能特异与双链DNA结合而发荧光的特性,建立了一种荧光PCR方法检测禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)的方法。整个检测过程2 h内可以完成,病毒的最低检出浓度为10-7,在特异性试验中,REV有特异性的...
关键词：禽网状内皮组织增殖病病毒(REV) real—time PCR 检测 
实时荧光定量PCR检测多重耐药大肠杆菌AcrA基因mRNA表达水平被引量：6
《中国兽医学报》2007年第5期679-682,共4页尹秀玲 王玮 邓旭明 郎需龙 张晶 王丽艳 柳巨雄 
国家自然科学基金资助项目(30270999)
体外单一药物诱导标准大肠杆菌ATCC25922,获得了耐氯霉素(CHL,MIC≥256 mg/L)、耐环丙沙星(CIP,MIC≥256 mg/L)、耐水杨酸钠(SAL,MIC≥275 mg/L)、耐四环素(T,MIC≥512 mg/L)的菌株。选取ATCC25922株,4株中度耐药菌SAL(175)、CHL(64)、T...
关键词：AcrA基因 实时荧光定量PCR 耐药大肠杆菌 MRNA 
实时荧光定量PCR检测PrP基因表达标准品质粒和标准曲线的构建被引量：12
《中国兽医学报》2005年第6期611-613,共3页宁章勇 赵德明 杨建民 崔亚利 孟丽平 吴长德 秦秀慧 马李颖 
国家自然科学基金资助项目(30371062);教育部博士点基金资助项目(20020019006)
对金黄地鼠PrP基因序列进行分析,选择其高度保守区域设计引物,对金黄地鼠各组织提取mRNA,经RTPCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,表明PrP基因...
关键词：实时荧光定量PCR PrP基因 标准曲线 重组质粒 动物传染性海绵状脑病 
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