实时荧光定量RT-PCR

作品数:376被引量:1535H指数:16
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实时荧光定量RT-PCR检测小反刍兽疫病毒方法的建立被引量:6
《中国畜牧兽医》2016年第11期2844-2851,共8页赵玲娜 金红岩 梁琳 李刚 
国家自然科学基金项目(31172342);国家科技支撑计划(2013BAD12B05);转基因重大专项(2014ZX0801203B)
本试验旨在建立一种快速、灵敏的诊断小反刍兽疫的方法。本研究通过RT-PCR方法扩增小反刍兽疫病毒N基因,连接到pMD19-T克隆载体上,构建质粒标准品。根据GenBank中中国流行毒株及Nigeria 75/1疫苗株N基因保守序列设计引物,利用SYBR Gree...
关键词:小反刍兽疫病毒 普通RT-PCR 实时荧光定量RT-PCR SYBR GreenⅠ 
牛副流感病毒3型TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量:14
《中国兽医科学》2014年第6期617-623,共7页董秀梅 朱远茂 蔡虹 王姝 吕闯 马磊 薛飞 
国家科技支撑计划项目(2012BAD12B-03-3);家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金项目(SKLVEB2013KFKT015)
根据牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)膜蛋白M基因设计引物及探针,以体外转录法制备的cDNA标准品为模板,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,对其特异性、敏感性、重复性进行了测定,并对人工感染BPIV3的牛群...
关键词:实时荧光定量RT-PCR TAQMAN探针 牛副流感病毒3型 
犬瘟热病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量:11
《中国兽医科学》2014年第6期589-592,共4页全传松 李博韬 姜骞 李连峰 于作 曲连东 
国家科技支撑计划项目(2013BAK11B01-31)
为建立快速检测犬瘟热病毒的诊断方法,根据GenBank中犬瘟热病毒核衣壳蛋白(NP)基因的保守序列设计1对特异性引物和1条特异性探针,通过对反应体系和反应条件的优化,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,该方法对犬瘟热病...
关键词:犬瘟热病毒 TAQMAN 实时荧光定量RT-PCR 
牛病毒性腹泻病毒SYBR Green I实时定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量:6
《新疆农业科学》2014年第2期333-339,共7页韩猛立 黄新 钟发刚 唐思静 
国家科技支撑计划(2102BAD43B00);国家自然科学基金项目(30960286);新疆农垦科学院青年科学基金项目(YQJ 201113)
[目的]在建立一种快速定量的用于检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的实时荧光定量RT-PCR检测方法.[方法]根据GenBank公布的BVDV 5′端非编码区(5′ UTR)核苷酸序列,软件分析后设计特异性扩增引物,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法.[...
关键词:牛病毒性腹泻病毒 实时荧光定量RT-PCR SYBR Green  
应用定量RT-PCR对猪瘟兔化弱毒疫苗的质量评价研究被引量:3
《中国预防兽医学报》2012年第6期464-467,共4页韩文 王楠 张兴娟 葛叶 韩秋颖 孙元 李素 仇华吉 
国家科技支撑计划(2006BAD06A03)
为进一步验证猪瘟兔化弱毒(HCLV)疫苗荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)与兔体定型热试验之间存在正相关性,本研究利用qRT-PCR方法对278批次HCLV疫苗进行检测,分别检测其疫苗含量及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)污染情况。结果表明,278批次猪瘟疫苗中...
关键词:猪瘟兔化弱毒疫苗 实时荧光定量RT-PCR 牛病毒性腹泻病毒 疫苗质量 
转基因枳橙中rolABC基因荧光定量表达分析方法的建立被引量:4
《湖南农业大学学报(自然科学版)》2010年第6期634-639,共6页袁飞荣 严佳文 罗坤 Alessandra Gentile 王晓君 刘东波 邓子牛 
国家科技支撑计划项目(2008BADB7B02)
以转rolABC基因枳橙B、D、E系及野生植株为材料,制备标准品,采用SYBR Green I染料,构建rol基因和β-actin基因的双标准曲线,校正引物扩增效率后,用2-△△Ct法对rol基因在嫩茎、嫩叶、功能叶、树皮和根中的mRNA水平进行相对定量,建立适合...
关键词:实时荧光定量RT-PCR rolABC基因 特洛亚枳橙 相对表达量 基因表达 
奶牛HSP70 基因表达及其连锁微卫星标记与耐热性状的相关性被引量:14
《遗传》2010年第9期935-941,共7页刘延鑫 李大齐 崔群维 史红霞 王根林 
国家科技支撑计划项目(编号:2006BAD04A01,2006BAD04A12);江苏省科技支撑计划项目(编号:BE2008306-2)资助
为了研究奶牛HSP70基因的mRNA表达规律和其紧密连锁的3个微卫星标记与耐热性状的相关性,文中在日平均温湿度指数(THI)为86.2(高温期)、70.9(临界高温期)和56.8(适温期)时分别采集10头处于同一泌乳阶段的同龄健康奶牛的尾静脉血,采用实...
关键词:奶牛 HSP70 耐热性 微卫星标记 实时荧光定量RT-PCR 
H9亚型鸭源禽流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR快速检测方法的建立被引量:4
《福建农业学报》2010年第4期387-391,共5页万春和 林甦 施少华 林秋敏 陈红梅 程龙飞 傅光华 林芳 林建生 黄瑜 
国家科技支撑计划项目(2006BAD06A01);福建省科技计划重点项目(2009N4001);中央高校基本科研业务费专项资金(2010KLEP001);国家973计划项目(2010CB530303)
针对H9亚型禽流感HA基因保守序列设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测模式的荧光定量RT-PCR(real-ti me RT-PCR,RRT-PCR),最低检测限为8.33×102拷贝质粒DNA,与常规PCR相比,灵敏度高出100倍。扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰...
关键词:H9亚型禽流感病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR(RRT-PCR) 
罗非鱼感染链球菌后hsp70基因表达研究被引量:9
《广西农业科学》2010年第4期371-374,共4页王瑞 黄艳华 陈明 梁万文 黄钧 
国家科技支撑项目(2008BADB9B04)
采用实时荧光定量RT-PCR检测吉富罗非鱼感染链球菌后脑和脾脏中热休克蛋白70(hsp70)基因表达情况,并按2-△△CT分析方法、使用7500 Software v2.0.1进行分析。结果表明,罗非鱼感染链球菌48 h内,hsp70 mRNA在脑组织表达变化不明显,而在...
关键词:罗非鱼 HSP70基因 链球菌 实时荧光定量RT-PCR 基因表达 
草原红牛不同组织雄激素受体基因表达量检测及比较研究被引量:4
《中国兽医学报》2010年第4期544-548,共5页秦立红 刘伟英 张丽颖 张金玉 张国梁 赵玉民 张嘉保 赵志辉 
国家科技支撑计划资助项目(2007BAD55B01);国家"863"计划项目(2008AA101010)
采用实时荧光定量RT-PCR技术检测雄激素受体基因(Androgen receptor gene,AR)在草原红牛公牛和母牛多种组织中的表达情况,探讨该基因在草原红牛公牛和母牛不同组织中的表达差异。结果表明,AR基因在所检测的公牛和母牛的心、肝、脾、肺...
关键词:雄激素受体(AR) 草原红牛 实时荧光定量RT-PCR 表达量 
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