吡咯喹啉醌

作品数：214被引量：319H指数：11
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食甲基菌吡咯喹啉醌生物合成相关基因的筛选及表型鉴定被引量：1
《生物技术通讯》2020年第6期653-658,共6页薄明井 寇航 陈静 张惟材 葛欣 熊向华 
国家科技重大专项(2018X09J18109-003)。
目的:通过Tn5转座诱变筛选食甲基菌中吡咯喹啉醌(PQQ)生物合成相关基因。方法:通过Tn5转座诱变食甲基菌J1-1,筛选PQQ合成水平变化明显的突变株,利用质粒拯救法鉴定突变位点,进而敲除对应基因验证其与PQQ合成的关系,再检测野生菌及敲除菌...
关键词：Tn5转座 吡咯喹啉醌 NADH/NAD+ 能量代谢 食甲基菌 
通过突变甲醇脱氢酶启动子提高甲基营养菌吡咯喹啉醌产量被引量：2
《生物技术通讯》2019年第5期609-613,692,共6页孙晓宇 薄明井 杨亚欣 张惟材 葛欣 熊向华 
国家科技重大专项（2018X09J18109-003）
目的:考察甲基营养菌J1-1甲醇脱氢酶启动子活性与吡咯喹啉醌(PQQ)产量的相关性。方法:通过定点突变甲醇脱氢酶P0771启动子,利用lacZ作为报告基因检测突变启动子的转录水平,筛选出活性下降的突变启动子在J1-1中替换天然启动子获得突变菌...
关键词：甲基营养菌 定点突变 甲醇脱氢酶 吡咯喹啉醌 
一株吡咯喹啉醌产生菌的筛选和初步鉴定被引量：4
《生物技术通讯》2018年第5期609-612,624,共5页杨亚欣 刘天 李彤 孙晓宇 汪建华 熊向华 张惟材 葛欣 
国家科技重大专项(2018X09J18109-003)
目的:筛选新的吡咯喹啉醌(PQQ)产生菌株。方法:收集土壤样品富集培养,分离菌株,NBT染色法快速筛选PQQ产生菌,经Native-PAGE复筛,NBT-Gly法和分光光度法相结合测定菌株PQQ产量;选取产量最高的1株菌考察菌株生长条件,扩增16S rDNA并测序,B...
关键词：吡咯喹啉醌 筛选 鉴定 生丝微菌 
食甲基杆菌J1-1吡咯喹啉醌生物合成突变株的筛选和鉴定被引量：1
《生物技术通讯》2018年第2期208-213,共6页李彤 景爱霞 杨亚欣 刘晓阳 汪建华 刘党生 熊向华 张惟材 
目的:通过Tn5转座诱变筛选食甲基杆菌J1-1吡咯喹啉醌(PQQ)生物合成相关基因。方法:构建食甲基杆菌J1-1 Tn5转座突变体库,筛选PQQ合成水平差异明显的突变株,利用质粒拯救法鉴定突变基因,通过基因敲除、回补及过表达进一步研究该基因与PQ...
关键词：食甲基杆菌J1-1 吡咯喹啉醌 Tn5转座 
高效液相色谱法分析吡咯喹啉醌被引量：6
《生物技术通讯》2015年第2期241-244,共4页魏静远 李大攀 赵炜楠 葛欣 毕波 熊向华 汪建华 杨秀萍 张惟材 
国家自然科学基金(31300083);中国博士后科学基金面上项目(2013M542443)
目的：建立一种通过高效液相色谱（HPLC）定量测定吡咯喹啉醌（PQQ）的分析方法。方法：将PQQ标准品及发酵制备的PQQ结晶粉末溶于10 mmol/L NaOH溶液，利用高效液相色谱仪进行测定。采用Waters XBridge C18（4.6 mmx150 mm，5μm）作为...
关键词：高效液相色谱 吡咯喹啉醌 分析方法 
通过转座诱变筛选甲基营养菌吡咯喹啉醌合成缺陷突变株被引量：2
《生物技术通讯》2014年第5期628-631,共4页韩月梅 葛欣 王鹤 熊向华 汪建华 刘党生 张惟材 
国家自然科学基金(31300083);中国博士后科学基金(2013M542443)
目的:对电转化等Tn5转座诱变条件进行优化,获得大量甲基营养菌MP688突变株,筛选吡咯喹啉醌(PQQ)合成缺陷突变株,并对失活基因进行鉴定。方法:通过电击方法对MP688株进行Tn5转座诱变;通过检测PQQ产量,选择不产或几乎不产PQQ的突变株,用...
关键词：甲基营养菌 吡咯喹啉醌 Tn5转座 电击转化 突变 
甲基营养菌MP688甲醇脱氢酶基因mpq1818的敲除及功能研究被引量：6
《生物技术通讯》2014年第5期632-635,共4页李大攀 葛欣 魏静远 熊向华 汪建华 杨秀萍 张惟材 
国家自然科学基金(31300083);中国博士后科学基金(2013M542443)
目的:研究甲醇脱氢酶基因mpq1818在甲基营养菌MP688生长代谢中的作用。方法:利用同源重组原理构建中间为庆大霉素抗性基因Gmr、两侧mpq1818基因上下游序列同源的敲除载体pAK0-up-Gmr-down,接合转移导入MP688,通过庆大霉素抗性和组合PCR...
关键词：甲基营养菌 甲醇脱氢酶 基因敲除 吡咯喹啉醌 
甲基营养菌MP688葡萄糖脱氢酶基因分离鉴定及性质研究被引量：4
《生物技术通讯》2013年第6期805-809,共5页王文溪 葛欣 韩月梅 熊向华 汪建华 张景海 张惟材 
国家自然科学基金(31100024)
目的:鉴定甲基营养菌MP688中的葡萄糖脱氢酶基因。方法:对甲基营养菌MP688基因组序列进行比对和分析,找到与已知细菌葡萄糖脱氢酶同源性最高的基因序列mpq_2164,且该基因所编码蛋白经分析具有跨膜结构域。设计引物扩增mpq_2164和缺失跨...
关键词：葡糖糖脱氢酶 甲基营养菌 表达纯化 吡咯喹啉醌 
3种检测吡咯喹啉醌的方法比较被引量：18
《生物技术通讯》2011年第4期544-547,共4页杨延新 熊向华 游松 张惟材 
国家科技支撑计划(2007BAI46B01)
目的:研究和比较3种检测吡咯喹啉醌(PQQ)的方法,确定各种方法的特点和适用范围。方法:设计和改进了3种检测PQQ的方法,分别为活性电泳法、光谱法和NBT-Gly法,探讨其检测限和线性范围、精密度、样品检测和加样回收率。结果:活性电泳法专...
关键词：吡咯喹啉醌 检测方法 活性电泳法 光谱法 NBT-Gly法 
甲基营养菌MP681基因组测序文库的构建
《生物技术通讯》2010年第6期775-778,共4页杨璐 熊向华 汪建华 张惟材 
国家高技术研究发展计划(2006AA020303);国家科技支撑计划(2007BAI46B01)
目的:建立甲基营养菌MP681基因组文库,用于鸟枪法测序。方法:提取MP681基因组DNA,经超声随机片段化及T4 DNA聚合酶末端修平处理后,与经SmaⅠ酶切、小牛肠碱性磷酸酶(CIP)去磷酸化处理的pUC19载体连接,电击转化大肠杆菌DH5α感受态,并通...
关键词：甲基营养菌 基因组测序 鸟枪法 文库构建 吡咯喹啉醌 
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