朊病毒

作品数:469被引量:439H指数:8
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我国人类朊病毒病检测监测体系建立及相关基础和应用研究被引量:3
《中国预防医学杂志》2010年第1期11-14,共4页董小平 洪涛 韩俊 高晨 石琦 张宝云 周伟 田婵 姜慧英 屈建国 张瑾 董辰方 张莹 赵同兴 
国家"863"计划(2001AA215391;2004AA215140);国家自然科学基金委项目(39928018;30130070;30571672和30500018);国家科技部十五攻关项目(2003BA712A04-02);国家科技攻关项目(2006BAD06A13-2);国家973项目(2007CB310505)
目的在我国开展克雅氏病(CJD)监测,探讨朊病毒病的发病机制。方法采用多学科交叉技术开展以疾病监测为导向的应用研究和发病机制为导向的基础研究。结果建立了CJD病原学诊断技术,制定了《克雅氏病诊断标准》,开展了覆盖12个省(市)自治区...
关键词:朊病毒 克雅氏病 监测 发病机理 
感染羊瘙痒因子263K株或139A株仓鼠脑组织中tau蛋白和磷酸化tau蛋白变化的研究
《病毒学报》2009年第3期202-207,共6页王桂荣 石崧 高晨 张宝云 田婵 董辰方 周瑞敏 李晓丽 陈操 韩俊 董小平 
国家科技攻关项目(2006BAD06A13-2);国家973项目(2007CB310505);国家自然科学基金委项目(No.30500018;30571672)资助
为探讨朊病毒病的神经病理特征,应用Western blot方法检测了感染羊瘙痒因子263K株或139A株的仓鼠脑组织中总tau蛋白和Ser396和Ser404位点发生磷酸化tau蛋白表达水平的变化;并应用Real Time PCR方法检测了tau mRNAs转录活性的改变。结果...
关键词:朊病毒 羊瘙痒因子 TAU蛋白 磷酸化TAU蛋白 
细胞浆中PrP蛋白的表达及其细胞毒性作用的研究被引量:1
《病毒学报》2008年第4期277-281,共5页王新 董辰方 石琦 石崧 王桂荣 雷艳君 安润 徐琨 姜慧英 韩俊 赵玉军 董小平 
国家科技攻关项目(2006BAD06A13-2);国家973项目(2007CB310505);国家自然科学基金委项目(No.30500018、30571672)资助
为了探讨在胞浆中表达的PrP的理化特征以及对细胞活性的影响,我们构建了胞浆型PrP(CytoPrP)真核表达质粒,瞬时转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,通过蛋白酶敏感性实验检测CytoPrP及其蛋白酶抗性,利用MTT和Trypan Blue细胞计数检测CytoPrP...
关键词:朊病毒 胞浆PrP 细胞毒作用 蛋白酶抗性 
一种基于链霉素沉淀的PrP^(Sc)检测方法的建立
《病毒学报》2008年第3期185-189,共5页董辰方 黄银霞 安润 陈建明 王小凡 单冰 雷艳君 韩露 张宝云 韩俊 董小平 
国家自然科学基金委重点项目(No30500018);国家自然科学基金委项目(No30571672);欧盟项目(NoQLRT200001441);国家科技攻关计划项目(No2003BA712A04-02)资助
建立一种新的基于链霉素沉淀的PrPSc的Western blot检测方法,用终浓度为60mmol/L的链霉素处理蛋白酶K消化的PrPSc贮存液,通过离心沉淀PrPSc,用Western blot对PrPSc的链霉素富集效果进行检测。结果显示,链霉素能够与PrPSc结合形成高分子...
关键词:朊病毒 链霉素沉淀 WESTERN BLOT 分子诊断技术 
PrP八肽重复突变体对细胞生长影响的探讨
《中华实验和临床病毒学杂志》2007年第3期208-210,共3页韩露 万言珍 韩俊 陈岚 孙力 王小凡 黄银霞 董辰方 姜慧英 董小平 
国家自然科学基金委资助项目(30500018、30571672);欧盟资助项目(QLRT200001441);国家科技攻关计划资助项目(2003BA712A04-02)
目的探讨PrP八肽重复突变体对细胞生长的影响。方法将具有遗传性朊病毒病相关不同八肽重复区插入突变的PRM,基因表达载体瞬时转染HeLa细胞,经噻唑蓝比色法(MTT)、Annexin—V/PI双染流式细胞检测。结果多八肽突变PrP蛋白对细胞的毒...
关键词:朊病毒 肽类 噻唑蓝比色法 细胞凋亡 
鼠源抗haPrP23—231噬菌体抗体库的构建和初步鉴定
《中华实验和临床病毒学杂志》2007年第3期211-213,共3页黄银霞 韩俊 董辰方 孙力 高晨 王小凡 韩露 周伟 张宝云 姜慧英 梁米芳 董小平 
国家自然科学基金委资助项目(30500018、30571672);欧盟资助项目(QLRT200001441)和国家科技攻关计划资助项目(2003BA712A04.02)
目的构建和鉴定鼠源抗haPrP23—231噬菌体抗体库。方法利用纯化的朊蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,取脾,提取细胞总RNA,逆转录cDNA,以其为模板进行免疫球蛋白Fab区基因的特异性PCR扩增,将轻链和重链Fd段基因分别构建到pComb3质粒,构建...
关键词:朊病毒 肽库 遗传工程 细菌噬菌体 
PrP及其缺失突变体与GFAP体外相互作用的初步研究
《中华实验和临床病毒学杂志》2007年第3期214-216,共3页董辰方 单冰 王小凡 韩俊 董小平 
国家自然科学基金委资助项目(30500018、30571672);欧盟资助项目(QLRT200001441);国家科技攻关计划资助项目(2003BA712A04-02)
目的研究PrP蛋白与GFAP蛋白是否发生分子间相互作用以及PrP蛋白多肽链中与GFAP蛋白相互作用的区域。方法制备仓鼠脑组织匀浆上清,通过原核表达系统以及体外翻译系统表达了全长的小鼠GFAP蛋白、人PrP蛋白以及各种缺失突变体,利用Pull-d...
关键词:朊病毒 蛋白质GFAP 分子诊断技术 
一种朊蛋白错误折叠循环扩增方法的建立
《中华实验和临床病毒学杂志》2007年第3期202-204,共3页韩俊 韩露 石琦 石菘 王新 张宝云 董小平 
国家自然科学基金委资助项目(30500018、30571672);欧盟资助项目(QLRT200001441);国家科技攻关计划资助项目(2003BA712A04.02)
目的建立一种类似于PCR的蛋白质扩增方法-蛋白错误折叠循环扩增技术(PMCA),用于朊病毒病脑组织中PrP^sc的检测。方法将不同浓度的羊瘙痒因子263K毒株原液与正常仓鼠脑组织匀浆混合,经反复孵育/超声,共10~15个循环。Western Blot...
关键词:朊病毒 蛋白错误折叠循环扩增技术 
朊蛋白N端和C端多肽特异性抗体的制备及ELISA检测技术的研究
《中华实验和临床病毒学杂志》2006年第4期308-311,共4页雷艳君 张宝云 高晨 韩俊 杨小洁 孙力 姜慧英 袁育康 董小平 
国家自然科学基金委项目(No.30571672;30500018);欧盟项目(No.QLRT200001441);国家科技攻关计划项目(No.2003BA712A04-02)
目的制备朊蛋白N端和C端多肽特异性抗体,并对ELISA方法在朊病毒病检测中的应用进行研究。方法构建人朊蛋白N端和C端多肽原核表达重组质粒,分别表达纯化融合蛋白。以此为抗原制备朊蛋白N端和C端多肽特异性抗体。ELISA和WesternBlot检测...
关键词:朊病毒 抗体 病毒 酶联免疫吸附测定 
四环素对朊病毒羊瘙痒因子263K蛋白酶抗性和感染性的影响
《中华神经科杂志》2005年第5期313-316,共4页郭燕军 韩俊 姚海兰 张宝云 高建梅 肖新莉 赵伟秦 王得新 董小平 
国家自然科学基金委重点项目(30130070);国家“863”计划项目(2004AA215140);欧盟项目(QLRT200001441);国家科技攻关计划资助项目(2003BA712A04-02)
目的研究四环素对朊病毒羊瘙痒因子263K(PrPSc)体外蛋白酶抗性和实验动物感染性的影响。方法以不同浓度的四环素与PrPSc进行不同时间的作用,经蛋白酶K的处理后以Westernblot方法检测具有蛋白酶抗性的PrPSc蛋白;将经四环素处理的PrPSc样...
关键词:四环素 蛋白酶 感染性 朊病毒 抗性 因子 瘙痒 PrP^Se Western  blot 潜伏期延长 mol/L moL/L 发病潜伏期 实验动物 不同时间 不同浓度 金黄地鼠 颅内接种 存在情况 抵抗能力 体外作用 剂量效应 动物感染 感染动物 
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