稀释复性

作品数:29被引量:78H指数:5
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赖脯胰岛素的稀释复性工艺被引量:2
《中国医药工业杂志》2018年第1期62-67,共6页郭新昆 周梦漪 黄宗庆 张喜全 冯军 
通过单因素、正交和响应面等试验优化赖脯胰岛素原包涵体的稀释复性条件,结果显示:在胱氨酸12.0 mmol/L、半胱氨酸1.0 mmol/L、山梨醇8.0%、p H 10.0、包涵体蛋白质浓度1.0 mg/ml的条件下,赖脯胰岛素原的复性收率达到65%。赖脯胰岛素原...
关键词:胰岛素类似物 复性 正交试验 响应面优化 
人P53的原核表达及包涵体复性研究被引量:5
《河南师范大学学报(自然科学版)》2016年第4期112-117,共6页刘慧 张守涛 郭亚楠 
国家自然科学基金青年科学基金(31501094);河南省基础与前沿技术研究项目(152300410032)
通过检测血清中p53蛋白及其抗体变化诊断肿瘤的ELISA试剂盒的研发需要大量制备p53蛋白.本研究通过构建人野生型p53基因的原核表达质粒pET-32a-p53,在大肠杆菌中诱导表达得到p53包涵体蛋白,经包涵体变性、亲和纯化、复性得到可溶p53蛋白...
关键词:P53 包涵体 透析复性 稀释复性 柱上复性 
重组猪源胰蛋白酶原的构建、表达与活性分析被引量:5
《药学进展》2014年第12期916-921,共6页冯雪婷 刘素丽 黄潇 王云康 龙军 金亮 曹荣月 
国家级大学生创新创业训练计划项目(No.J1030830);国家自然科学基金(No.81172973;No.81373232)
目的:构建、表达重组猪源胰蛋白酶原,并对其进行分离纯化和酶活性分析。方法:利用大肠埃希菌表达系统(p ET-28a,宿主菌BL21DE3)优化天然猪源胰蛋白酶原基因,经乳糖诱导表达重组胰蛋白酶原蛋白,采用阴离子交换色谱法分离纯化,以SDS-PAG...
关键词:猪源胰蛋白酶原基因 包涵体变性 乳糖诱导 稀释复性 
重组人心肌肌钙蛋白I纯化方法的对比
《国际检验医学杂志》2014年第14期1817-1818,1820,共3页郝庆钦 周建平 许秀丽 刘培 温新宇 王玲 田亚平 
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2011AA02A111)
目的对比两种重组人心肌肌钙蛋白I(rhcTnI)纯化方法,获取稳定的rhcTnI,促进心肌肌钙蛋白(cTnI)诊断标准化的研究。方法超声破碎工程菌获取rhcTnI包涵体,经2%Tritonx-100,2mol/L脲洗涤后溶解在8mol/L脲中,分别经CMFF柱上复性和稀释复性纯...
关键词:心肌肌钙蛋白I 稀释复性 柱上复性 纯化 
核糖核酸酶Onconase的稀释复性条件优化研究被引量:3
《化学与生物工程》2013年第10期57-60,共4页郭红 徐殿胜 王庆诚 
采用稀释复性方法从包涵体中复性得到有活力的Onconase蛋白,并与传统的醋酸沉淀复性方法进行了比较,考察了复性温度、尿素浓度、氧化型谷胱甘肽(GSSG)加入时间对复性效果的影响。结果表明,在最佳复性温度为4℃、采用最佳复性体系(先加G...
关键词:核糖核酸酶 包涵体 稀释复性 分离纯化 
重组人膜联蛋白的尿激酶原融合蛋白衍生物的复性及制备被引量:2
《北京师范大学学报(自然科学版)》2012年第6期626-629,共4页王苹 井健 
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目
构建重组人膜联蛋白的尿激酶原融合蛋白基因,并在大肠杆菌中实现高效表达.目标基因表达产物以包涵体形式存在于细菌细胞质中.通过稀释复性的实验方法,对目标基因表达产物进行了变复性处理及进一步的分离纯化,最终制备出具有正确空间结...
关键词:尿激酶原 包涵体 稀释复性 纯化 生物活性 
蛋白质复性技术
《生物产业技术》2012年第2期74-79,共6页孙彦 
重组蛋白质的过表达常导致其在胞内发生错误折叠和聚集,形成被称为包含体的聚集体。因此,蛋白质复性是许多基因重组蛋白质药物生产过程的重要步骤。本文简要介绍包含体提取、纯化和溶解工艺,重点阐述蛋白质复性技术,包括稀释复性、...
关键词:重组蛋白质 复性技术 蛋白质复性 溶解工艺 稀释复性 蛋白质药物 错误折叠 生产过程 
单环刺螠硫醌氧化还原酶的表达、纯化和复性被引量:6
《中国海洋大学学报(自然科学版)》2010年第6期81-86,共6页马玉彬 谭志 张志峰 
国家自然基金面上项目(40776074)资助
硫化物是1种广泛分布的有毒物质。硫醌氧化还原酶(SQR)是硫化物代谢的关键酶。单环刺螠是1种生活在潮间带下区及潮下带中的底栖生物。本研究为了获得具有活性的单环刺螠SQR,将其基因的开放阅读框cDNA克隆到原核表达载体pET28a中,转化大...
关键词:单环刺螠 硫醌氧化还原酶 蛋白表达与纯化 稀释复性 
脲变性牛碳酸酐酶B的稀释复性过程及其集聚作用研究被引量:2
《分析科学学报》2010年第2期133-137,共5页陈清法 张潭 罗海燕 王世祥 
陕西省自然科学基金(No.2001K10-G3-(3))
采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、高效凝胶排阻色谱以及激光光散射光谱研究了脲变性牛碳酸酐酶B的稀释复性过程及其集聚作用。在脲变性牛碳酸酐酶B的稀释复性过程中,当最终复性液中脲浓度大于2.0mol/...
关键词:牛碳酸酐酶B 凝胶电泳 凝胶排阻色谱 集聚体 稀释复性  
重组猪羧肽酶原B在大肠杆菌中的表达与复性研究被引量:2
《药物生物技术》2010年第1期39-44,共6页张笑岩 张会勇 范豪 李泰明 刘景晶 曹荣月 
国家自然科学基金资助项目(No.30672464;30872393);江苏省自然科学基金资助项目(No.BK2007170)
利用大肠杆菌表达系统,表达猪源羧肽酶原B蛋白包涵体,并对包涵体的体外复性条件进行优化。对猪源羧肽酶原B基因进行设计,优化稀有密码子,并将基因片段插入到pET28a载体中,构建表达质粒pET28a-proCPB,并转化入BL21(DE3)中。通过乳糖诱导...
关键词:重组羧肽酶B 大肠杆菌 稀释复性 
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