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稳定表达eGFP-戊型肝炎病毒复制子的建立及体内外特征: 《昆明理工大学学报（自然科学版）》2024年第3期202-217,共16页黄芬夏月平李云龙赵勇琴禹文海魏大巧; National Natural Science Foundation of China(82260396);Natural Science Foundation of Yunnan Province(202401AS070057);Natural Science Foundation for Distinguished Young Scholars of Yunnan province(202001AV070005);Program for Innovative Research Team(in Science and Technology)in University of Yunnan Province(2020);The Chinese Academy of Medical Sciences Innovation Fund for Medical Sciences(2021-I2M-1-024);Technical Innovation talents of Yunnan Province(202205AD160008).; 戊型肝炎病毒(HEV)是急性病毒性肝炎的主要病原体.为了寻找有效的HEV研究工具,利用反向遗传学构建了携带绿色荧光蛋白(eGFP)的重组HEV感染性克隆——eGFP-HEV.eGFP-HEV转染Huh7.5.1细胞后,在荧光显微镜下能够直接观察到荧光信号,可以实...; 关键词：HEV感染性克隆 eGFP报告基因病毒复制示踪抗HEV药物研发

绿色荧光蛋白分裂肽基因重组乙型肝炎病毒复制子模型的建立被引量：1: 《微生物与感染》2021年第2期79-87,共9页田青右朱园飞常豪于琳邓强; 为构建一种重组乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制子模型,使其能够在病毒感染的细胞中表达可视化报告基因蛋白,本研究删除HBV基因组核心蛋白(HBV core,HBc)编码区部分序列,构建HBV1.1-ΔHBc113复制子载体。利用内含肽(intein)介...; 关键词：乙型肝炎病毒复制子内含肽绿色荧光蛋白分裂肽

利用Gibson Assembly技术构建乙型肝炎病毒1.1倍体复制子被引量：1: 《厦门大学学报（自然科学版）》2015年第3期324-330,共7页方琳琳宋浏伟杨林吴勇袁权夏宁邵; 乙型肝炎病毒(HBV)基因组各开放阅读框高度重叠,因此构建可在体外细胞模型中复制的HBV DNA质粒至少要包含1.1倍以上的HBV基因组.构建HBV1.1倍体复制子的传统克隆方法涉及多步DNA酶切/连接,操作复杂,耗时较长.本研究发展了基于新型克隆技...; 关键词：乙型肝炎病毒 GIBSON ASSEMBLY 1.1倍体

HCV细胞培养系统及其在中草药提取物抗HCV研究中的应用被引量：4: 《临床肝胆病杂志》2015年第1期115-117,共3页李京涛常占杰席奇刘亚珠宋春荣南然李日向魏海梁闫曙光; 陕西省教育厅课题(2013JK0815);咸阳市科技局课题(2014K04-04);陕西中医学院课题(14XJZR08);陕西中医学院附属医院课题(2014-34); 应用中草药治疗丙型肝炎报道较多,然而这些研究大多采用中药复方制剂进行临床治疗,疗效局限。由于一种中药含有多种活性物质,某些物质之间在体内甚至有相互拮抗的作用,因此,对于治疗结果的作用机理很难阐述清楚。简述了HCV假病毒、复制...; 关键词：肝炎丙型慢性肝炎病毒属中草药细胞培养技术复制子综述

HCV复制子与细胞培养体系研究进展被引量：1: 《生命科学》2014年第8期858-865,共8页刘宁冯悦张阿梅岳蕾夏雪山; 国家自然科学基金项目(81260248;813602-47);国家科技支撑计划项目(2011BAI15B0121;2012BAI39B01;2014BAI01B01); 丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染所导致的传染性肝病,呈现世界性流行态势,严重危害人类健康。由于病毒自身高度突变,以及广泛高效的细胞培养体系和合适的小动物模型缺乏,目前尚无可有效预防的疫苗。自1989年丙型...; 关键词：丙型肝炎病毒复制子基因型嵌合体

含EGFP报告基因单顺反子HCV亚基因组复制子载体的构建和表达: 《中国病原生物学杂志》2014年第5期389-393,399,共6页陈中湘刘晓蕾刘丽莎崔光晶邬国军马琼山刘水平; 湖南省科技计划项目(No.2013SK3069;2014SK3248); 目的构建含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的HCV复制子表达载体,并实现其在细胞中的复制表达。方法用分子生物学基因克隆技术对HCV 2a型复制子的基因进行改造,用EGFP基因替代HCV基因组中的包膜基因(E1和E2)体外构建重组单顺反子HCV...; 关键词：丙型肝炎病毒复制子绿色荧光蛋白基因表达

双荧光素酶标记丙型肝炎病毒亚基因组复制子细胞模型的建立被引量：2: 《军事医学》2013年第9期681-684,691,共5页彭剑淳高博王怡付秋霞樊炜周欠欠贾帅争詹林盛; 北京市自然科学基金资助项目(7112104;7122136); 目的构建双荧光素酶标记丙型肝炎病毒(HCV)亚基因组复制子细胞模型,为HCV研究提供有效工具。方法通过单克隆筛选及慢病毒感染构建双荧光素酶标记的HCV亚基因组复制子细胞模型(HCV Fluc-UbiGluc)。利用荧光素酶检测、Western印迹检测鉴...; 关键词：丙型肝炎病毒荧光素酶类萤火虫 Gaussia荧光素酶细胞模型复制子

双核酶自切割HCV全基因组复制子的构建及其体内外复制的特性: 《中华肝脏病杂志》2013年第5期348-353,共6页何长龙刘青山郭艳朱研毛青兰林; 国家自然科学基金（81071977）l国家教委回国人员启动基金（2010JYB001）,第三军医大学回国人员启动基金（02009XHG08）; 目的建立可在细胞内直接启动HCV复制并且能产生感染性病毒颗粒的HCV全基因组复制子，进行HCV体内外实验研究。方法在HCVJFHl及JFHl／GNDcDNA序列两侧分别加上核酶序列与pcDNA3．1载体构建重组质粒pcDNA3．1-RZ-JFHI和pcDNA3．1-RZ-JFHl...; 关键词：肝炎病毒丙型全基因组复制子 HUH7 5细胞昆明小鼠

乙型肝炎病毒复制表达载体的构建与表达被引量：1: 《北京医学》2013年第3期200-203,共4页魏飞力乔录新李庆石英陈德喜; 国家自然科学基金面上项目(81272266);国家自然科学基金青年科学基金(81100288);北京市卫生局215人才工程基金; 目的构建乙型肝炎病毒(HBV)复制表达载体,验证其在HepG2细胞系中的复制和表达。方法通过引物设计合成,以实验室构建的HBV C1亚型质粒通过PCR、酶切、克隆等分子生物学技术,构建HBV复制表达载体。利用转染试剂(Fugene HD Transfection Re...; 关键词：乙型肝炎病毒 HBV复制子 HEPG2 瞬时转染

干扰素刺激基因ISG20抗丙型肝炎病毒的作用研究被引量：2: 《中华肝脏病杂志》2013年第1期33-37,共5页徐华雷宇钟珊彭凤英周智李奎任红; 国家自然科学基金（81171563、31000397）l重庆市科委自然科学基金（CATC2009BB5063）;重庆市教委基金（KJ070317）; 目的研究干扰素刺激基因ISG20对HCV的抑制作用及其机制，为探索丙型肝炎新的治疗方法提供依据。方法将含ISG20基因，其无功能突变体ISG20m和相应空白载体的质粒pcDNA3．1瞬时转染Huh7、Huh7．5和HEK293细胞，观察ISG20对HCV单顺反子复制...; 关键词：干扰素肝炎病毒丙型复制子 ISG20 体外研究

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