瞬时转染

作品数:136被引量:211H指数:7
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重组腺相关病毒瞬时表达系统的理性设计及其高效生产工艺的建立
《生物技术通报》2024年第12期61-71,共11页李蕊蕊 那道远 王洪林 赵亮 谭文松 叶倩 
【目的】探究关键病毒基因和辅助基因对rAAV生产的影响以指导病毒基因表达框的理性设计和工艺优化,实现rAAV生产效率的提升。【方法】首先,明确用于生产rAAV的关键基因元件rep和cap基因的组成和比例,以及辅助病毒基因的关键序列对rAAV...
关键词:重组腺相关病毒 瞬时转染表达系统 质粒设计 HEK293细胞 工艺优化 
哺乳动物细胞表达人细胞珠蛋白
《生物技术》2024年第4期403-406,438,共5页李来庆 梁焕坤 陈翠翠 钟树海 陆嫣红 董文其 
[目的]构建带His标签的人细胞珠蛋白(cytoglobin,CYGB)哺乳细胞表达载体,转染CHO细胞和HEK293细胞表达CYGB。[方法]采用全基因合成并通过双酶切法将CYGB基因插入到表达载体pcDNA3.4中,经双酶切和测序验证后转染大肠埃希菌DH5α菌株,提...
关键词:细胞珠蛋白 哺乳动物细胞表达 CHO细胞 HEK293细胞 His标签 质粒 pcDNA3.4载体 瞬时转染 蛋白活性 
再生基因4(REG4)真核表达载体的构建及其蛋白在HEK293T细胞中的表达、纯化被引量:2
《现代检验医学杂志》2023年第4期35-39,共5页徐杨 杜惠芬 李克生 柴丹丹 石晓玲 连晓雯 张学良 
兰州市科技发展指导性计划项目(2019-ZD-131):高性能抗RegIV单克隆抗体的制备及鉴定;甘肃省自然科学基金项目(21JR7RA866):PG,MUC1,HIK1083联合检测在胃早癌诊断中的临床研究。
目的构建再生基因4(regenerating gene 4,REG4)的真核表达载体,转染人胚肾细胞293T(human embryonic kidney 293T cells,HEK 293T),获得重组人再生胰岛衍生蛋白IV(regenerating islet-derived protein IV,Reg IV)。方法根据NCBI数据库R...
关键词:再生基因4 再生胰岛衍生蛋白Ⅳ 真核表达 人胚肾细胞293T 瞬时转染 蛋白纯化 
大黄鱼头肾细胞系瞬时转染方法的选择及优化被引量:2
《生物技术》2023年第3期287-292,321,共7页王贤慧 慕鹏飞 敖敬群 
国家自然科学基金-青年科学基金项目(42106135)。
[目的]为了选择适合大黄鱼头肾细胞(LYCK)的转染试剂并优化转染条件,用于开展后期大黄鱼细胞生物学研究。[方法]分别将LipofectamineTM2000、FuGENE HD、X-tremeGENE 9及X-tremeGENE HP与带有加强型绿色荧光蛋白(EGFP)编码基因的质粒pEG...
关键词:大黄鱼头肾细胞 细胞转染 绿色荧光蛋白 瞬时转染 
线性化聚乙烯亚胺介导的高效瞬时转染条件的优化
《国际生物制品学杂志》2023年第3期156-160,共5页陈玥如 赵忆宁 唐悦 王婉 傅生芳 李雄雄 
国家科技重大专项(2013ZX09402302)。
目的优化线性化聚乙烯亚胺(polyethylenimine linear,PEI)介导的高效瞬时转染条件,提高重组蛋白在人胚胎肾(human embryonic kidney,HEK)293F悬浮细胞中的瞬时表达效率.方法构建和鉴定重组质粒增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluore...
关键词:线性化聚乙烯亚胺 瞬时转染 人胚胎肾293F细胞 增强型绿色荧光蛋白 
呼吸道合胞病毒融合前F蛋白分泌表达条件的优化和建立
《微生物学免疫学进展》2022年第4期5-9,共5页陈玥如 赵忆宁 唐悦 王剑 王宇 李雄雄 
目的通过表达条件的优化,提高融合前呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)F蛋白在HEK 293F细胞中的表达。方法将优化后的融合前RSV F基因片段插入到pLexm载体中,构建重组表达质粒,通过瞬时转染的方式将重组质粒转入HEK293F...
关键词:呼吸道合胞病毒 融合前RSV F蛋白 瞬时转染 条件优化 
嘌呤霉素对C2C12成肌细胞增殖的影响及瞬时转染浓度的筛选被引量:1
《解剖科学进展》2021年第3期257-260,264,共5页张利敏 刘雨佳 王新琢 陈云秋 张爽 焦光宇 
国家自然科学基金(81170068);辽宁省重点研发攻关项目(2017225009);辽宁省科学技术基金(2015020521)。
目的研究不同浓度嘌呤霉素对C2C12细胞的生长抑制情况,确定细胞转染的最佳药物筛选浓度。方法对C2C12细胞进行不同浓度(0、0.5、1、2、4、8μg/ml)、不同时间(24、48、72、96h)嘌呤霉素的处理,将细胞分为阴性对照组、阳性对照组和5组不...
关键词:嘌呤霉素 筛选浓度 瞬时转染 细胞增殖 C2C12细胞 
CD137L融合蛋白真核表达载体的构建与表达被引量:1
《药物生物技术》2021年第3期233-238,共6页徐胜 王淑珍 
真核表达系统因具有完整的翻译后修饰、表达蛋白免疫原性较小而成为制药行业生产蛋白药物的新方向。该研究目的是构建CD137L融合基因真核表达载体,瞬时转染HEK293F细胞实现高效表达并进行蛋白纯化与活性分析。以该实验室保存的含有CD137...
关键词:CD137L 融合蛋白 真核表达 瞬时转染 HEK293F 蛋白纯化 信号肽 
猪CD163瞬时转染CHO-K1超表达细胞模型的构建及鉴定
《武汉轻工大学学报》2021年第2期1-7,共7页王柳 张泽锴 周焕焕 周傲 张晶 陈洪波 
武汉市应用基础前沿项目(2019020701011494);湖北省知识创新专项(自然科学基金一般面上项目,2018CFB535);动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室开放课题(KLAEMB-2020-03).
猪CD163基因的基因组包括16个内含子、18个外显子,其相关蛋白产物是血红蛋白-触珠蛋白清除剂并可作为病原体受体,在介导感染、维持细胞内环境稳态等方面具有重要功能。本研究旨在构建猪CD163瞬时转染仓鼠卵巢上皮细胞系CHO-K1的超表达...
关键词: CD163 CHO-K1 转染 表达 
羊耳菊活性部位对PXR高表达HepG2细胞中CYP3A4蛋白表达的影响
《贵州医科大学学报》2020年第10期1137-1142,共6页杨畅 宋菲 何俊奇 王永林 李勇军 兰燕宇 陈一飞 刘亭 
国家自然科学基金(U1812403);贵州省科学技术厅人才团队项目[黔科合平台人才(2016)5613,5677]。
目的:探讨羊耳菊活性部位(IC-MAC)对孕烷X受体(PXR)高表达HepG2细胞中细胞色素P4503A4酶(CYP3A4)蛋白表达的影响。方法:将质粒pcDNA3.1-PXR转化至DH5α感受态大肠杆菌中扩增并提取质粒,采用FuGENE 6转染试剂,将pcDNA3.1-PXR质粒转染至...
关键词:催化域 羊耳菊 活性部位 瞬时转染 细胞色素CYP3A4 孕烷X受体 
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