VP7蛋白

作品数:55被引量:108H指数:5
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相关作者:关贵全独军政田占成殷宏罗建勋更多>>
相关机构:东北农业大学中国农业科学院兰州兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所吉林农业大学更多>>
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非洲马瘟病毒VP7蛋白的可溶性表达及抗体阻断ELISA方法的初步建立
《中国兽医科学》2024年第10期1318-1326,共9页徐婧 户鑫兵 宋昱庆 张鸿歌 田占成 关贵全 罗建勋 殷宏 魏衍全 独军政 
国家重点研发计划项目(2021YFD1800500);甘肃省技术创新引导计划项目(23CXNA0016);甘肃省基础研究创新群体项目(22JR5RA024);甘肃省科技厅项目(22CX8NA011);农业科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-2016-LVRI)。
为了实现非洲马瘟病毒(AHSV)VP7蛋白的可溶性表达,制备其特异性单克隆抗体,建立AHSV VP7阻断ELISA抗体检测方法,通过对编码AHSV VP7蛋白的基因序列进行突变设计与密码子优化,以大肠杆菌表达系统表达可溶性VP7蛋白并进行纯化,免疫BALB/c...
关键词:非洲马瘟病毒 VP7蛋白 可溶性表达 单克隆抗体 阻断ELISA 
荧光素酶免疫吸附法高灵敏检测蓝舌病病毒抗体方法的建立
《中国兽医科学》2024年第7期881-887,共7页张鸿歌 田占成 独军政 王琼洁 康棣 户鑫兵 张忠辉 关贵全 殷宏 
国家重点研发计划项目(2021YFD1800500);国家肉牛牦牛产业技术体系专项(CARS-37);甘肃省自然科学基金项目(22JR5RA029);甘肃省基础研究创新群体项目(22JR5RA024);甘肃省科技厅项目(22CX8NA011);农业科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-2016-LVRI)。
为了建立一种高效检测动物血清中蓝舌病病毒(BTV)抗体的检测方法,以BTV血清群特异性VP7抗原与荧光素酶蛋白相融合表达的标记蛋白(VP7-NLuc)为检测抗原建立了荧光素酶免疫吸附(VP7-NLuc-LISA)方法,用于检测BTV抗体。结果表明:BTV阳性血...
关键词:蓝舌病病毒 VP7蛋白 荧光素酶免疫吸附试验 C-ELISA 血清学检测 
非洲马瘟病毒重组VP7蛋白在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备与鉴定被引量:1
《中国兽医科学》2023年第8期971-976,共6页王轩莹 户鑫兵 罗昭依 田占成 高闪电 殷宏 罗建勋 关贵全 苟惠天 独军政 
国家重点研发计划项目(2021YFD1800500);中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(1610312021014);甘肃省基础研究创新群体项目(22JR5RA024);甘肃省科技厅项目(22CX8NA011);农业科技创新工程(CAAS-ASTIP-2016-LVRI)。
非洲马瘟是由非洲马瘟病毒感染马引起的一种以发热、皮下和肺组织水肿及内脏出血为主要特征的烈性传染病。本研究首先通过PCR以合成的AHSV S7基因为模板扩增得到开放阅读框片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pPROEX HTb,成功构建重组质粒p...
关键词:非洲马瘟病毒 VP7蛋白 多克隆抗体 
非洲马瘟病毒VP7蛋白在昆虫细胞中的表达及其抗体制备被引量:5
《中国兽医科学》2022年第3期317-323,共7页户鑫兵 高闪电 田占成 范亚亚 关贵全 刘光远 罗建勋 殷宏 独军政 
中国农业科学院创新工程项目(CAAS-ASTIP-2016-LVRI);农业农村部中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(1610312021014)。
为了表达非洲马瘟病毒(AHSV)VP7蛋白并制备其多克隆抗体,参考GenBank中已公开的AHSV基因序列,人工合成编码AHSV-1 VP7蛋白的S7基因全长序列,利用PCR技术扩增得到S7基因片段,将其克隆到p FastBac^(TM)HTb载体上,构建重组载体p FastBac^(T...
关键词:非洲马瘟病毒 VP7蛋白 昆虫细胞表达 多克隆抗体 
蓝舌病病毒VP7蛋白的可溶性纯化及多克隆抗体的制备被引量:3
《中国兽医科学》2021年第9期1128-1133,共6页丁晓攀 车永军 郭艳妮 高闪电 田占成 ALI MOHAMED Darien Kheder 关贵全 孙世琪 殷宏 独军政 
国家自然科学基金项目(31672562);国家重点研发计划项目(2017YFD0502304)。
首先参照GenBank中已发表的基因序列人工合成蓝舌病病毒VP7基因,将其克隆到表达载体pSMK上。选取含有正确开放阅读框的重组质粒pSMK-VP7,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,于16℃利用IPTG诱导剂进行诱导表达,优化表达条件,纯化重组VP7蛋白,...
关键词:蓝舌病病毒 VP7基因 可溶性表达 纯化 多克隆抗体 
鹿流行性出血热病毒核心样颗粒的制备与鉴定被引量:1
《中国兽医科学》2021年第8期1023-1028,共6页黄超华 花群俊 吴江 曹琛福 林彦星 史卫军 林永涛 曾少灵 杨俊兴 花群义 
“十三五”国家重点研发项目(2017YFD0502304,2017YFD0501805-02)。
为制备鹿流行性出血热病毒(EHDV)的核心样颗粒(CLPs),本研究将鹿流行性出血热病毒(EHDV)L3与S7基因片段插入至昆虫杆状病毒穿梭载体pFastBac-Dual中,构建重组质粒pFastBac-Dualvp3-vp7,并通过转座获得重组杆状病毒质粒Bacmid-vp3-vp7,...
关键词:鹿流行性出血热病毒 VP3蛋白 VP7蛋白 核心样颗粒 
帕利亚姆病毒VP7蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备被引量:1
《中国兽医科学》2021年第2期176-183,共8页李占鸿 宋子昂 杨振兴 肖雷 李卓然 谢佳芮 李华春 杨恒 
国家“十四五”重点研发计划项目(2016YFD0500908);国家自然科学基金项目(31760744);云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目(2017HB055)。
本研究将帕利亚姆病毒(PALV)VP7蛋白的编码区序列插入原核表达质粒pET-32a(+),构建出重组质粒pET32-PALV-VP7,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)进行重组蛋白的诱导表达。采用镍离子亲和层析进行重组蛋白的纯化,通...
关键词:帕利亚姆病毒 VP7蛋白 原核表达 多克隆抗体 
牛蓝舌病病毒VP7抗体胶体金试纸条检测方法的建立被引量:3
《中国兽医科学》2019年第1期7-12,共6页王慧煜 刘亚东 梅琳 艾军 孔玉方 韩雪清 
十三五重点研发计划项目(2016YFD0500908);公益性行业科研专项(201510017)
为建立一种快速检测牛蓝舌病病毒抗体的免疫层析方法,本研究通过胶体金标记蓝舌病病毒VP7蛋白,以兔抗牛IgG作为检测线,抗蓝舌病毒VP7蛋白单克隆抗体作为质控线,采用间接法制备了胶体金免疫层析试纸条。结果显示,该胶体金试纸条在蓝舌病...
关键词:蓝舌病病毒 VP7蛋白 单克隆抗体 胶体金 免疫层析试纸条 
非洲马瘟病毒VP7蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立被引量:6
《中国兽医科学》2013年第3期256-260,共5页潘佳亮 高利 相文华 戚亭 郭巍 
公益性行业(农业)科研专项(201003075)
为了建立可特异性地检测血清中非洲马瘟病毒抗体的方法,优化并合成非洲马瘟病毒VP7蛋白基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,目的蛋白获得了高效表达,且有...
关键词:非洲马瘟病毒 VP7蛋白 间接酶联免疫吸附试验 
非洲马瘟病毒VP7基因在重组杆状病毒中的表达及抗原性检测被引量:4
《中国兽医科学》2010年第8期793-796,共4页曹琛福 花群义 吕建强 秦智锋 杨俊兴 曾少灵 阮周曦 陈兵 史卫军 
国家高技术研究发展计划(863)项目(2006AA10Z445);深圳出入境检验检疫局科技项目(SZ2009008)
利用pFastBacHTA质粒将非洲马瘟病毒(AHSV)血清4型的VP7基因重组入杆状病毒,并感染昆虫细胞Sf9。结果显示,VP7蛋白在真核细胞内获得了表达,但表达量较低。免疫印迹试验证实,VP7重组蛋白具有较好的免疫原性,将其作为检测抗原包被酶标板,...
关键词:非洲马瘟病毒 VP7蛋白 真核表达 抗原性 
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