蛋白质反式剪接

作品数:25被引量:43H指数:3
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蛋白质环化的研究进展被引量:3
《生物工程学报》2016年第4期430-439,共10页王心哲 张光亚 
国家自然科学基金(Nos.21376103;31201314);福建省自然科学基金(No.2013J01048);华侨大学研究生科研创新能力培育计划资助~~
天然蛋白质在生物体内主要以线性形式存在,由于多数蛋白质(酶)热稳定性较差,制约了其在工业催化、食品制造、医药领域的高效应用。自然界中发现的天然环肽类物质具有首尾相连的环化结构,使蛋白质具有较高的稳定性,为改造酶的结构、提高...
关键词:蛋白质反式剪接 表达蛋白连接 转肽作用 光催化内含肽 SPY Tag/Spy Catcher 
Split Inteins介导的多肽链两端标记
《中国生物化学与分子生物学报》2015年第5期535-542,共8页张晓玲 戴旭东 林瑛 孟清 
国家自然科学基金(No.31070698);教育部博士点基金项目(No.20120075110007);教育部高校特色项目(No.TS2011DHDX025);上海市科委攻关项目(No.14521100700);上海市科委国际合作项目(No.14520720200);国家外专局“高端外国专家项目”(No.GDW20143100069;No.GDW20143100070;No.GDW20143100071)资助~~
多肽链多位点特异性标记有助于了解蛋白质的结构与功能,特别是在蛋白质的动态构象研究方面.但是,现有的多肽链多位点特异性标记方法各有局限性,并且种类有限,所以有必要开发新的多肽链多位点特异性标记方法以满足研究需求.本文以Diub(ub...
关键词:断裂蛋白质内含子 蛋白质反式剪接 N端和C端标记 荧光基团 
Npu DnaE内含肽构建及其对293T细胞高效反式剪接活性分析
《山东医药》2013年第44期10-13,I0002,共5页张矫 崔文静 马祥敏 王雯雯 王欣 
天津市高等学校科技发展基金计划项目(20090139)
目的构建Npu DnaE内含肽,探讨Npu DnaE内含肽是否在293T细胞中具备高效反式剪接活性。方法制备融合基因Vn-NDn-myc和NDc-Vc,插入pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro载体,构建质粒。转染293T细胞,荧光显微镜下观察目的蛋白Venus是否形成。48 h后收集...
关键词:NPU DnaE 内含肽 蛋白质反式剪接 
多种S1断裂内含肽间的体内交叉反应(英文)
《中国生物化学与分子生物学报》2013年第8期734-739,共6页宋慧玲 刘相钦 孟清 
Supported by National Science and Engineering Research Council grant of Canada;National High Technology Research and Development Program of China(863 Program,No.2006AA03Z451);National Natural Science Foundation of China(No.31070698);Shanghai Key Projects of Basic Research(No.10JC1400300);the Ph.D.Programs Foundation of Ministry of Education of China(No.20120075110007)~~
断裂内含肽含有两个独立分离的多肽片段(N端内含肽和C端内含肽),它催化蛋白质反式剪接反应,在蛋白质研究与蛋白质工程中已得到诸多实际应用.在蛋白质反式剪接过程中,内含肽的N端内含肽和C端内含肽通过结构互补特异性地非共价组合.然而,S...
关键词:断裂内含肽 蛋白质反式剪接 交叉反应 
基于蛋白质反式剪接在大肠杆菌中表达鲎C因子CES多肽被引量:6
《基因组学与应用生物学》2013年第6期707-712,共6页王影影 齐兴梅 刘涛 祁静 张春 郭玲玲 
便携式细菌内毒素快速检测仪及检测试剂(ZXY2012011);苏州市分子诊断和治疗技术重点实验室(ZXJ2-012005);用rAAV位点特异整合载体建立一株治疗帕金森氏症的分泌神经生长因子(GDNF)的成人脑神经星状前体细胞的细胞株(30970880)共同资助
鲎C因子是鲎血细胞中一种对内毒素具有高亲和力的丝氨酸蛋白酶原,可替代鲎试剂用于内毒素检测。鲎C因子N端Cys-EGF-sushi1-sushi2(CES)片段中的sushi1区域是与内毒素结合的关键部位。本研究在sushi1结构域中的特定位点断开CES与内毒素...
关键词:反式剪接 内含肽 东方鲎C因子 CES多肽 内毒素 荧光检测 
增强的蛋白质反式剪接作用提高肝脏靶向双载体凝血第八因子转基因小鼠的血浆凝血活性
《中国科学:生命科学》2013年第4期298-303,共6页朱甫祥 刘泽隆 王笑蕾 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金(批准号:ZR2010CM061);教育部留学回国人员科研启动基金(批准号:20071108)资助项目
基于蛋白质反式剪接的双载体转凝血第八因子(FⅧ)基因受到剪接效率低的不利影响,本研究旨在增强蛋白质剪接元件蛋白内含子(intein)之间的相互作用,通过改善蛋白质反式剪接效率提高小鼠体内双载体转FⅧ基因后血浆剪接FⅧ蛋白的分泌量和...
关键词:凝血第八因子 蛋白质反式剪接 双载体转基因 血浆凝血活性 
亮氨酸拉链提高小鼠血浆中剪接的凝血因子Ⅷ凝血活性
《生物化学与生物物理进展》2012年第12期1220-1225,共6页朱甫祥 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金(ZR2010CM061);烟台市科技计划项目(2008152);教育部留学回国人员科研启动基金(20071108);鲁东大学学科建设经费资助项目~~
培养细胞实验表明,亮氨酸拉链通过改善内含肽(intein)的蛋白质剪接效率,提高双载体转B区缺失型凝血因子Ⅷ(BDD-FⅧ)基因细胞剪接FⅧ蛋白的分泌量和活性.本文从C57BL/6小鼠门静脉注射含亮氨酸拉链和Ssp DnaB内含肽融合的BDD-FⅧ的重链和...
关键词:B区缺失型凝血Ⅷ因子 亮氨酸拉链 双载体转基因 蛋白质反式剪接 血浆凝血活性 
Cys突变体凝血Ⅷ因子的蛋白质反式剪接
《药学学报》2012年第6期734-738,共5页朱甫祥 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金资助项目(ZR2010CM061);教育部留学回国人员科研启动基金项目(20071108)
为改善蛋白质反式剪接效率,将B-区缺失型FⅧ(BDD-FⅧ)重链的Tyr664和轻链的Thr1826突变为Cys,双载体共转COS-7细胞,观察了细胞内蛋白质剪接、二硫键形成和细胞培养上清液中分泌的剪接BDD-FVIII量和活性。Western blotting检测结果显示,...
关键词:凝血Ⅷ因子 蛋白质反式剪接 双载体 转基因 Cys突变 
Met662和Asp1828的Cys突变增强蛋白内含子对共表达的BDD-FVⅢ重链和轻链的剪接被引量:2
《中国生物化学与分子生物学报》2012年第3期234-239,共6页朱甫祥 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 
山东省自然科学基金(No.ZR2010CM061);烟台市科技计划项目(No.2008152);教育部留学回国人员科研启动基金(No.20071108)~~
本文旨在通过B区缺失型凝血因子8(BDD-FVⅢ)重、轻链间二硫键形成,改善蛋白质反式剪接效率,提高双载体转BDD-FVⅢ基因功效.将BDD-FVⅢ重链A2区的Met662和轻链A3区的Asp1828突变为Cys,用蛋白内含子融合的重链和轻链基因共转染HEK293细胞,...
关键词:B区缺失型凝血因子8 共表达 二硫键 蛋白内含子 蛋白质反式剪接 
新型T+1断裂蛋白质内含子的构建
《东华大学学报(自然科学版)》2012年第1期50-54,共5页王瑾 林瑛 郑言成 孟清 
国家"八六三"高技术研究发展计划资助项目(2006AA03Z451);国家自然科学基金资助项目(30800186);教育部高等学校博士学科点专项科学基金(新教师基金)资助项目(200802551026)
首次从天然C端外显子为苏氨酸(Thr)的标准蛋白质内含子(TerSnf2)构建出两类T+1型断裂蛋白质内含子:Snf-S0和Snf-S1,通过蛋白印迹法测定Snf-S0和Snf-S1介导的蛋白质反式剪接效率分别达到53.5%和33.3%;当这两类断裂蛋白质内含子C端外显子...
关键词:断裂蛋白质内含子 蛋白质反式剪接 TER Snf2 
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