易错PCR

作品数:113被引量:249H指数:8
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一种利用整合酶位点特异性重组构建随机突变库的方法被引量:1
《基因组学与应用生物学》2017年第6期2440-2446,共7页汪先薇 
中国国家基础研究发展973计划(2012CB721102);自然科学基金(31300034)共同资助
易错PCR利用的低保真聚合酶不具有3'到5'的校对功能,能够引入较高几率的随机突变,经常被用来构建突变库。位点特异性串联重组(SSRTA)方法拥有丰富的整合位点配对组合,可以为大片段基因簇重组提供多种模块组合。该串联重组方法特异性高...
关键词:易错PCR 多片段串联重组 整合酶 
酶的定向进化研究及其在工业生物催化中的应用被引量:8
《生物加工过程》2011年第4期69-75,共7页苏龙 庄宇 何冰芳 
国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2009CB724700);国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2007AA021306)
综合概括了各种蛋白质改造与微生物代谢途径改造的非理性定向进化技术的原理、特点,介绍了这些技术在高性能工业生物催化剂改造中的应用。
关键词:定向进化 DNA改组 易错PCR 工业生物催化 
应用易错PCR定向进化甘油脱氢酶被引量:1
《华侨大学学报(自然科学版)》2010年第6期661-666,共6页李梓君 方柏山 杨仲丽 刘嘉 
国家重点基础研究发展(973)计划项目(2006AA020103);国家自然科学基金资助项目(20676048)
经过连续易错聚合酶链式反应(Error-Prone PCR)向克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)甘油脱氢酶基因中引入突变,并构建突变文库.依据突变体催化番红O显色的特性,采用琼脂平板法和96微孔板法相结合的高通量筛选方法,成功获得突变体gldA-...
关键词:甘油脱氢酶 克雷伯杆菌 定向进化 易错聚合酶链式反应 
酶的定向进化及其应用被引量:7
《生物加工过程》2005年第3期7-13,共7页孙志浩 柳志强 
国家973项目(2003CB716008);国家自然科学基金项目(20476039)
综述了生物催化剂(酶)分子定向进化的产生、原理、方法及应用,深入阐述酶分子定向进化过程中的相关问题,重点介绍了易错PCR(Error-prone PCR)和DNA改组(DNA shuffling)等几种典型的酶定向进化方法与成功实例,展望了生物定向进化研究的...
关键词:生物催化剂 蛋白质工程 非理性设计 定向进化 易错PCR DNA改组 
D-泛解酸内酯水解酶的定向进化被引量:8
《生物工程学报》2005年第5期773-781,共9页柳志强 孙志浩 郑璞 冷泳 钱嘉南 
国家重点基础研究发展规划(973)项目(No.2003CB716008);国家自然科学基金项目(No.20476039)资助。~~
易错PCR结合DNA改组方法向D泛解酸内酯水解酶基因中引入突变,并构建突变体库。利用酶的催化特点和产物特性建立了基于平板初筛和高效液相复筛的两步法D泛解酸内酯水解酶活性筛选系统。用该筛选系统以酶活力和pH稳定性为指标对突变体库...
关键词:串珠镰孢霉菌 D-泛解酸内酯水解酶 易错PCR DNA改组 筛选 定向进化 
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