高欲燃

作品数：11被引量：63H指数：6
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供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
发文主题：多克隆抗体牛呼吸道合胞体病毒单克隆抗体E2蛋白牛病毒性腹泻病毒更多>>
发文领域：农业科学生物学更多>>
发文期刊：《中国生物工程杂志》《中国预防兽医学报》《中国奶牛》《微生物学报》更多>>
所获基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划哈尔滨市科技攻关计划项目黑龙江省“十一五”科技攻关项目更多>>
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牛病毒性腹泻病毒E2蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定被引量：3
《中国生物工程杂志》2013年第4期40-45,共6页王姝 朱远茂 蔡红 马磊 史鸿飞 吕闯 董秀梅 高欲燃 薛飞 
国家科技支撑计划子课题(2012BAD12B03-3);中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(0302012002);哈尔滨市科技攻关计划项目(2010AA6AN019;AA6BN020)资助项目
为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)糖蛋白E2单克隆抗体(MAb),利用原核表达并且纯化的重组糖蛋白E2(rE2)免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。采用以BVDV为检测抗原的间接ELISA筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯化后获得2...
关键词：牛病毒性腹泻病毒 E2 单克隆抗体 IGM 
牛呼吸道合胞体病毒核蛋白的表达及其单克隆抗体的制备被引量：4
《中国生物工程杂志》2012年第12期20-24,共5页马磊 朱远茂 蔡红 王姝 史鸿飞 吕闯 董秀梅 高欲燃 薛飞 
哈尔滨市科技攻关计划(2010AA6AN019;2012AA6BN020);公益性行业(农业)科研专项经费(201003060-04);中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(0302012002)资助项目
利用牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)接种牛肺细胞(BL),提取病毒RNA。通过RT-PCR扩增BRSV的核蛋白基因,然后定向克隆到原核表达载体pET30a,获得重组表达质粒pET30a-N。将重组质粒转化表达菌BL21(DE3),经增菌培养和IPTG诱导以及SDS-PAGE和Weste...
关键词：牛呼吸道合胞体病毒核蛋白 单克隆抗体特异性 
牛副流感病毒3型NP单抗的制备及初步应用被引量：9
《中国预防兽医学报》2011年第12期970-973,共4页吕闯 朱远茂 董秀梅 蔡红 于作 高欲燃 薛飞 
哈尔滨市科技攻关项目(2010AA6AN019);中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(ZGKJ201009)
为制备牛副流感病毒3型(BPIV3)核衣壳蛋白(NP)单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的重组NP(rNP)免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。采用以BPIV3为检测抗原的间接ELISA方法筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯...
关键词：牛副流感病毒3型 核衣壳蛋白 单克隆抗体 特异性 
一株3型牛腺病毒的分离与鉴定被引量：11
《中国预防兽医学报》2011年第3期169-172,共4页于作 朱远茂 蔡红 高欲燃 董秀梅 吕闯 薛飞 
公益性行业(农业)科研专项经费(201003060-04);哈尔滨市科技攻关计划项目(2010AA6AN019)
本研究于2009年由患急性呼吸道疾病牛的鼻拭子中分离获得一株病毒,经形态特征、血清学试验及PCR鉴定表明,该病毒与牛腺病毒3型(BAV-3)相似。对其E2A基因进行序列测定,并与GenBank中登录的BAV1型、3型、4型及人、绵羊、鼠等其它种属来源...
关键词：牛腺病毒3型 分离 鉴定 
牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的多克隆抗体制备及鉴定被引量：6
《中国预防兽医学报》2011年第3期227-231,共5页高欲燃 朱远茂 康健 史鸿飞 李娇 任宪刚 冯军科 于作 薛飞 
黑龙江省十一五科技攻关计划项目(GA06B202-3);兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费(NKLVBP200816)
为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白的兔源多克隆抗体,本研究利用表达BVDV E2蛋白的重组质粒pET30a-E2转化E.coli BL21(DE3),经诱导表达获得重组E2蛋白。Western blot检测显示纯化蛋白能够与BVDV参考阳性血清反应。以纯化的重组E2...
关键词：牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 多克隆抗体 
牛呼吸道合胞体病毒研究进展被引量：9
《中国奶牛》2010年第9期1-4,共4页冯军科 薛飞 朱远茂 任宪刚 史鸿飞 高欲燃 
黑龙江省科技攻关项目(GA06B202-3)
牛呼吸道合胞体病毒（bovine respiratory syncytial virus,BRSV）是引起犊牛呼吸道疾病的主要病原之一。本病早在1968年就有记载,1970年BRSV首次从患有呼吸道疾病的牛体中分离到[1]。其危害性在于BRSV感染发病率很高,达到60%～80%,死...
关键词：牛呼吸道合胞体病毒 呼吸道疾病 VIRUS 秋冬季节 发病率 死亡率 病原 犊牛 
Asia 1型口蹄疫病毒VP1基因的表达鉴定及其多抗制备被引量：3
《中国预防兽医学报》2010年第4期285-288,共4页朱远茂 任宪刚 史鸿飞 高欲燃 于作 冯军科 相文华 薛飞 
国家863计划(2006AA10A204)
本研究旨在表达口蹄疫病毒(FMDV)的VP1全基因并制备特异性的多克隆抗体。利用PCR方法扩增Asia 1 IND 49197株VP1全基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为31.6ku,以包...
关键词：ASIA I口蹄疫病毒 VP1基因 多克隆抗体 
套式RT-PCR检测牛呼吸道合胞体病毒的研究被引量：13
《中国预防兽医学报》2010年第3期238-240,共3页史鸿飞 朱远茂 高欲燃 任宪刚 冯军科 于作 薛飞 
黑龙江省"十一五"科技攻关项目(GA06B202-3)
为了检测牛呼吸道合胞体病毒(BRSV),根据已发表的融合蛋白(F)基因序列,设计了套式RT-PCR引物,初步建立了BRSV的套式RT-PCR检测方法。对138份牛鼻腔棉拭子进行了检测,结果检测到了BRSV阳性样品54份,总的阳性检出率为39.1%。对大部分BRSV...
关键词：牛呼吸道合胞体病毒 套式RT-PCR 牛鼻腔拭子 
表达牛呼吸道合胞体病毒G蛋白基因的重组Ⅰ型牛疱疹病毒的构建与鉴定被引量：8
《中国预防兽医学报》2010年第2期81-85,共5页冯军科 朱远茂 任宪刚 祖立闯 李娇 史鸿飞 高欲燃 童光志 薛飞 
黑龙江省十一五科技攻关项目(GA06B202-3)
为构建表达牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)G蛋白基因的牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)重组病毒,本研究将人工合成的BRSV全长G蛋白基因编码序列插入到巨细胞病毒(CMV)启动子之下构建TK基因缺失转移载体。利用磷酸钙-DNA沉淀法将该转移载体与亲本病毒BH...
关键词：牛呼吸道合胞体病毒 G蛋白基因 牛疱疹病毒Ⅰ型 磷酸钙-DNA沉淀法 
O型FMDV VP1基因的表达鉴定及其多克隆抗体的制备被引量：1
《中国预防兽医学报》2009年第7期568-571,共4页任宪刚 薛飞 朱远茂 冯军科 史鸿飞 高欲燃 
国家"863"计划(2006AA10A204)
为制备O型口蹄疫病毒(FMDV)VPI抗血清,本研究人工合成了FMDV的VPI基因,并克隆构建了采用PCR方法以pUC57-VP1重组质粒,以其作为模板,经PCR将VPI基因亚克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pET-VP1。重组质粒鉴定验证后,转化至大...
关键词：口蹄疫病毒 VP1基因 表达鉴定 多克隆抗体制备 
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