何小宁

作品数：9被引量：43H指数：5
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供职机构：西北农林科技大学更多>>
发文主题：基因转染绿色荧光蛋白牛胎儿成纤维细胞巨噬细胞人溶菌酶基因更多>>
发文领域：农业科学生物学更多>>
发文期刊：《中国兽医学报》《畜牧兽医学报》《西北农业学报》《农业生物技术学报》更多>>
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同源重组技术在转基因动物抗病育种中的应用被引量：1
《中国兽医学报》2011年第5期759-762,共4页宋永利 华松 何小宁 兰杰 刘永刚 张涌 
转基因生物新品种培育科技重大专项资助项目(2008ZX08007-004-01)
1抗病育种的概述转基因就是将目的基因导入受体细胞的过程。由于这一技术能够实现基因的种间转移,用于动物育种将大大提高育种的目的性而加快育种进程。
关键词：转基因动物 抗病育种 转基因技术 同源重组 
牛胎儿皮肤成纤维细胞的分离培养及转染Ipr1基因被引量：2
《畜牧兽医学报》2011年第4期585-592,共8页宋永利 何小宁 华松 兰杰 郑月茂 贺小英 李吉霞 权富生 张涌 
抗病转基因牛新品种培育(2008ZX08007-004)
为了为核移植提供供体细胞,本研究构建了真核表达载体PEGFP-SRA-Ipr1,并研究了牛胎儿皮肤成纤维细胞的体外分离培养,进行了Ipr1基因转染。克隆Ipr1基因和SR-A启动子,并构建了巨噬细胞特异性真核表达载体。用组织块贴壁法分离培养牛胎儿...
关键词：供体细胞 真核表达载体 Ipr1基因 牛胎儿成纤维细胞 电穿孔 绿色荧光蛋白 
巨噬细胞RAW264.7的培养及电转染条件的优化被引量：8
《西北农业学报》2010年第9期21-24,共4页宋永利 陆昕 邱爽 祁英培 华松 兰杰 何小宁 贺小英 张涌 郑月茂 
抗病转基因牛新品种培育(2008ZX08007-004)
为了建立最优的巨噬细胞RAW264.7培养方法和电转染条件,在细胞培养时采用两种方法了解细胞的培养特性并进行电转染条件的优化,建立并验证RAW264.7细胞快速、无血清培养体系的电转染方法。以绿色荧光蛋白（GFP）为报告基因,进一步优化巨...
关键词：巨噬细胞 体外培养 基因转染 
猪乳腺干细胞的分离培养及EGFP基因转化被引量：1
《中国兽医学报》2010年第7期958-961,共4页郑月茂 贺小英 党永辉 何小宁 李艳艳 刘军 
国家高技术研究与发展计划("863")资助项目(2004AA213072);西北农林科技大学科研专项资助项目(07ZR001)
利用乳腺干细胞培养技术体系,从成年猪乳腺组织中分离培养乳腺干细胞,通过脂质体介导转染技术,将EGFP基因导入乳腺干细胞,诱导转基因乳腺干细胞向乳腺上皮细胞分化,观察其分化特点。结果成功分离培养出乳腺干细胞,获得转EGFP基因乳腺干...
关键词：乳腺干细胞 EGFP基因 猪 
牛胎儿成纤维细胞β-防御素(hBD3)基因转染及转基因克隆胚制备被引量：11
《农业生物技术学报》2010年第4期707-712,共6页马晶晶 王勇胜 何小宁 郑月茂 张涌 
国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2004AA213072)资助
用脂质体法将含有人β防御素3(hBD3)和绿色荧光蛋白(EGFP)基因的乳腺特异性表达载体pEBB导入牛胎儿成纤维细胞,经G418筛选和PCR鉴定获得阳性细胞,将这些转hBD3基因的阳性细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞,进行PCR鉴定,获得转基因克隆胚...
关键词：人β-防御素(hBD-3)基因 牛胎儿成纤维细胞 转基因克隆胚 胚胎移植 受体 
转增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)猪羊水干细胞的体外分化被引量：2
《农业生物技术学报》2009年第5期792-796,共5页郑月茂 贺小英 何小宁 
国家高技术研究发展计划(863)项目(No.2008AA101006);西北农林科技大学科研专项(No.07ZR001)资助
利用羊水干细胞培养技术体系,从胎龄30d猪胎儿羊水中分离培养羊水干(AFS)细胞;通过脂质体介导转染技术,将增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)导入羊水干细胞,诱导转基因羊水干细胞贴壁分化,观察其体外增殖、分化特点;采用RT-PCR技术检测干细...
关键词：羊水干细胞 EGFP基因 细胞标记 细胞分化 猪 
牛皮肤成纤维细胞的分离培养及转染人溶菌酶基因被引量：6
《农业生物技术学报》2008年第5期798-803,共6页贾淑玲 刘利杰 彭树英 何玉龙 何小宁 张涌 
国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2001AA213081)资助
为了为核移植法制作转人溶菌酶基因克隆牛提供供体细胞,研究体外分离培养牛皮肤成纤维细胞并进行了人溶菌酶基因转染。首先采用组织块贴壁法分离培养牛耳成纤维细胞,经传代纯化后,脂质法将含有双重筛选标记的人溶菌酶乳腺特异性表达载...
关键词：牛皮肤成纤维细胞 溶菌酶 基因转染 脂质体 绿色荧光蛋白 
转人乳铁蛋白基因山羊乳腺上皮细胞的研究被引量：7
《畜牧兽医学报》2006年第12期1282-1286,共5页郑月茂 刘凤军 何小宁 张涌 
西北农林科技大学人才基金资助项目;国家科技部"863"高技术研究发展规划资助项目(2001AA213081)
利用脂质体包裹含人乳铁蛋白基因的重组质粒,并导入到山羊乳腺上皮细胞,经G418及PCR筛选获得阳性细胞;转染细胞增殖后经激素诱导,培养液上清通过Western blot检测证明,转染细胞表达并分泌出人乳铁蛋白,其分子质量为58 ku。
关键词：人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体 绿色荧光蛋白 转基因山羊乳腺上皮细胞 
优化山羊体细胞核移植方案的研究被引量：6
《畜牧兽医学报》2006年第10期972-976,共5页刘凤军 安志兴 高立功 张玉玲 张晶晶 何小宁 郑月茂 张涌 
国家"863"计划项目(2001AA213081)
以乳腺细胞、胎儿成纤维细胞和颗粒细胞为供体细胞进行核移植,比较了供体细胞类型、细胞冷冻及核移植的重建方法(胞质内注射、电融合)对重构胚早期发育的影响。结果:(1)乳腺细胞支持重组胚的发育能力(囊胚率7.14%)显著低于成纤维细胞(16...
关键词：核移植 体细胞 山羊 胞质内注射 电融合 
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