牛传双

作品数：8被引量：52H指数：4
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供职机构：华中农业大学动物医学院更多>>
发文主题：伪狂犬病毒ORF5基因猪繁殖与呼吸综合征病毒DNA疫苗ORF5更多>>
发文领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
发文期刊：《华中农业大学学报》《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》《病毒学报》《中国兽医学报》更多>>
所获基金：国家自然科学基金武汉市青年科技晨光计划国家高技术研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
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伪狂犬病病毒Ea株UL14基因的克隆、序列分析及表达
《中国兽医学报》2008年第3期264-267,共4页张辉 肖少波 方六荣 牛传双 陈焕春 
国家自然科学基金资助项目(30400322);霍英东青年教师基金资助项目(91029)
从伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA中克隆含UL14基因的BamHⅠ第3片段并进行序列分析。根据测定的序列设计1对能扩增UL14基因完整编码区的引物,PCR扩增UL14基因并将其插入原核表达载体pGEX-KG,获得原核表达质粒pKG-UL14,转化BL21(DE3),在IPTG...
关键词：伪狂犬病病毒 UL14 序列分析 表达 
修饰的ORF5基因增强猪繁殖与呼吸综合征DNA疫苗的体液免疫被引量：6
《中国兽医学报》2005年第1期1-3,共3页江云波 方六荣 肖少波 牛传双 张辉 陈焕春 
武汉市青年科技晨光计划资助项目 (2 0 0 2 5 0 0 10 41)
为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) ORF5基因 DNA疫苗的免疫效力 ,将通用型辅助性 T淋巴细胞表位 (PADRE)插入 ORF5的中和表位和覆盖表位间 ,获得修饰后的 ORF5基因 ORF5 M。在此基础上 ,进一步构建了ORF5 M的真核表达质粒 p CI- ...
关键词：ORF5基因 ELISA抗体 猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV 新型疫苗 免疫效力 覆盖 DNA疫苗 中和抗体 体液免疫 
增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：2
《华中农业大学学报》2004年第5期489-491,共3页牛传双 方六荣 肖少波 张辉 陈焕春 
国家自然科学基金项目 (3 9970 5 5 9)资助
增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP(EGFP/V16 3A/S175G)是一种发光能力更强、更稳定的新型绿色荧光蛋白。为了获得大量高纯度的蛋白 ,将mut4EGFP基因插入原核表达载体 pTWIN1中 ,使之与几丁质结合域 (CBD) 内含肽 (intein)融合 ,获得原...
关键词：绿荧光蛋白 突变体mut4EGFP 表达 纯化 
表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5的重组伪狂犬病毒TK^-/gG^-/GP5^+的构建及其生物学特性初步探讨被引量：26
《病毒学报》2004年第3期249-254,共6页方六荣 肖少波 江云波 牛传双 张辉 陈焕春 
国家"十五"863项目(2001AA213051);国家自然科学基金(30300257);武汉市青年科技晨光计划(20025001041)。
以伪狂犬病毒基因缺失标志疫苗株TK-/gG-/LacZ+为亲本株,通过同源重组,构建了表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要免疫原性蛋白GP5的重组伪狂犬病毒TK-/gG-/GP5+。经PCR、Southern杂交、Westernblot证实构建正确,并能表达GP5。同时,...
关键词：伪狂犬病毒 猪繁殖与呼吸综合征 生物学特性 重组病毒 表达 
猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因在昆虫细胞中的高效融合表达被引量：6
《微生物学报》2003年第1期8-14,共7页方六荣 肖少波 牛传双 张辉 陈焕春 
国家高技术研究发展计划 ( 863)项目 ( 2 0 0 1AA2 1 30 5 1 );武汉市青碾科技晨光计划项目 ( 2 0 0 2 5 0 0 1 0 4 1 )~~
对杆状病毒Bac to Bac表达系统的转座质粒pFastbac1进行改造 ,即在其多角体蛋白启动子下游插入谷胱苷肽 S 转移酶 (glutathione S transferase ,GST)基因 ,构建GST融合表达转座质粒pFGST。通过转座和转染Sf9细胞 ,证实该系统能高水平表...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 昆虫细胞 高效融合表达 
猪繁殖与呼吸综合征病毒YA株ORF5基因的克隆与序列分析被引量：9
《华中农业大学学报》2002年第6期501-505,共5页方六荣 牛传双 肖少波 方兵兵 张辉 陈焕春 
武汉市青年科技晨光计划项目 (2 0 0 2 5 0 0 10 41)
以猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)YA株为材料 ,采用RT -PCR扩增其ORF5基因全长cDNA并进行序列测定和比较分析。结果YA株ORF5基因cDNA编码区长 6 0 3bp ,可编码 2 0 0个氨基酸残基。与欧洲型代表株LV株、美洲型代表株VR - 2 332株在氨...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 YA株 克隆 序列分析 ORF5基因 
含伪狂犬病毒完整UL49基因及部分UL48基因片段的克隆与序列分析被引量：2
《华中农业大学学报》2002年第4期306-310,共5页方六荣 牛传双 肖少波 余晓岚 陈桦 陈焕春 
湖北省自然科学基金 (2 0 0 0J10 0 )资助项目;华中农业大学大学生科技创新基金 (SRF 2 0 0 1A3 0 )资助项目
以地高辛标记的伪狂犬病毒 (PRV)Ea株UL4 9.5基因片段为探针 ,同SalI、KpnI、BamHI消化的PRVEa株基因组DNA进行Southern杂交 ,确定SalI 2 .8kb、KpnI 17.0kb、BamHI 2 5 .0kb片段中含UL4 9基因。将SalI2 .8kb片段克隆到pUC119中 ,利用...
关键词：基因克隆 伪狂犬病毒 完整UL49基因 部分UL48基因 序列分析 
表达绿色荧光蛋白突变体的重组伪狂犬病毒的构建及其增殖特性被引量：4
《生物化学与生物物理学报》2002年第6期757-762,共6页方六荣 陈焕春 肖少波 张辉 牛传双 
国家自然科学基金资助项目 (No .3 9970559)~~
将绿色荧光蛋白突变体M 1(EGFPS14 7/P)基因融合到伪狂犬病毒 (PRV)非必需糖蛋白 gG的第 8个氨基酸下游 ,通过同源重组、空斑纯化和PCR筛选获得能表达M 1并导致gG基因部分缺失的重组病毒 gG-/M1+ 。重组病毒经Southern杂交、Western印...
关键词：表达 绿色荧光蛋白突变体 重组伪狂犬病毒 构建 增殖特性 标记 
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