端义坤

作品数：16被引量：23H指数：2
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供职机构：武汉生物制品研究所更多>>
发文主题：单克隆抗体跨膜蛋白人类免疫缺陷病毒1型表面抗原抗乙型肝炎病毒更多>>
发文领域：医药卫生生物学更多>>
发文期刊：《中国生物制品学杂志》《中华微生物学和免疫学杂志》《微生物学免疫学进展》更多>>
所获基金：国家科技攻关计划国家科技重大专项更多>>
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抗人CD4嵌合抗体基因真核表达质粒的构建及其瞬时表达被引量：2
《中国生物制品学杂志》2011年第9期997-1002,共6页胡迪超 张爱华 潘勇兵 端义坤 孙可芳 张银川 杨晓明 
目的构建抗人CD4嵌合抗体基因真核表达质粒,并在哺乳动物细胞中进行瞬时表达。方法采用RLM-RACE法克隆WuT4抗体可变区和信号肽序列,并采用基因拼接法构建嵌合抗体基因真核表达质粒。采用脂质体法瞬时转染HEK293T、CHO-DHFR-和COS-7 3种...
关键词：抗原 CD4 RLM-RACE 基因拼接 嵌合抗体 瞬时表达 
低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀中α_1-抗胰蛋白酶的分离纯化被引量：1
《中国生物制品学杂志》2011年第9期1090-1093,共4页周雁翔 端义坤 李策生 彭良俊 张爱华 邹汉武 
目的采用低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀(FractionⅣ,FⅣ)中提取α1-抗胰蛋白酶(α1-Antitrypsin,α1-AT),制备较高纯度的α1-AT制剂。方法 FⅣ沉淀经过滤、ConA Sepharose 4B亲和层析、DEAE Sepharose Fast Flow一步离子交换层析...
关键词：Α1抗胰蛋白酶 层析 活性 
荧光标记CD3/CD4/CD8单克隆抗体的质量控制
《中国生物制品学杂志》2007年第10期750-753,763,共5页孙可芳 肖建 闭兰 端义坤 赵亚杰 张涛 张爱华 
"十五"国家科技攻关计划"艾滋病防治关键技术及产品研究"(2004BA719A06-01).
目的对荧光素标记的CD3、CD4和CD8单克隆抗体进行质量控制。方法采用多参数的流式细胞分析技术,对单色、多色荧光标记抗体的偶联率及偶联效果进行分析与评价,并进行稳定性试验。结果荧光标记的单克隆抗体特异性保持完好;单色标记的抗体...
关键词：流式细胞术 荧光素标记 单克隆抗体 质量控制 
WuT3无血清培养上清中单克隆抗体纯化工艺的建立被引量：2
《中国生物制品学杂志》2007年第8期593-595,599,共4页詹骞 邹昌勇 杜厚明 冷武军 雷继军 杨明 端义坤 孙可芳 侯胜桐 齐建新 王志友 董之昌 
国家重点科技攻关项目96-C02-03-05部分工作.
目的对WuT3杂交瘤细胞生物反应器无血清培养上清中单克隆抗体进行分离纯化,建立中试分离纯化工艺。方法采用两步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化WuT3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后,进行中量试验和中试放大。结果建立的纯...
关键词：无血清培养 杂交瘤细胞 单克隆抗体 纯化工艺 
荧光染料R-藻红蛋白标记小鼠抗人CD4单克隆抗体被引量：2
《微生物学免疫学进展》2006年第2期32-34,共3页赵亚杰 闭兰 孙可芳 端义坤 詹骞 金玉玲 吕兰君 张爱华 
以R-藻红蛋白(R-PE)标记小鼠抗人CD4单克隆抗体,形成单色或和用其他荧光染料标记的CD系列单抗组成双色、多色的荧光试剂,应用于流式细胞仪检测分析。用异双功能交联试剂SPDP和SMCC分别活化R-PE和CD4单抗,用DTT使经SPDP活化后的R-PE巯基...
关键词：R-藻红蛋白 小鼠抗人CD4单克隆抗体 
HIV跨膜蛋白gp36和gp41的截短及融合表达被引量：1
《中国生物制品学杂志》2006年第2期124-126,138,共4页肖健 朱华松 尹娟 孙可芳 汪超英 端义坤 余模松 
目的将HIV-1的跨膜蛋白gp41和HIV-2跨膜蛋白gp36进行截短,并在大肠杆菌中进行融合表达。方法用PCR将gp41和gp36的编码基因进行截短,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体pGEM-T上,然后用BamHⅠ、EcoRⅠ和SalⅠ切下目的基因,并构建到表达载...
关键词：人类免疫缺陷病毒 跨膜蛋白 截短 融合表达 
我国狂犬病疫苗生产用毒株糖蛋白氨基酸序列及其抗原位点分析被引量：2
《中国生物制品学杂志》2006年第1期31-33,51,共4页尹娟 肖健 周志军 朱华松 端义坤 
目的分析我国狂犬病疫苗生产用毒株aG(PG)株和CTN株糖蛋白结构及抗原位点的差异。方法登录GenBank搜寻aG株和CTN株糖蛋白的氨基酸序列,用Vector NTI Suite8软件分析两毒株糖蛋白的同源性;用DNAStar5分析两毒株糖蛋白的二级结构和潜在的...
关键词：狂犬病 疫苗 糖蛋白 氨基酸 抗原位点 
噬菌体展示抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子的筛选和序列分析
《中国生物制品学杂志》2005年第1期1-4,共4页张爱华 端义坤 闭兰 赵亚杰 张智 阎莹 王志友 余模松 
目的　从自建的免疫噬菌体展示Fab抗体库中获得抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子 ,并进行基因序列分析。方法　采用纯化的乙型肝炎病毒表面抗原作为包被抗原 ,对自建的 4× 10 5Fab噬菌体抗体库进行富集筛选 ,从阳性强的次级库中挑选...
关键词：FAB抗体 抗乙型肝炎病毒 表面抗原 阳性克隆 噬菌体展示 克隆 ELISA 限制性内切酶 包被 片段 
采用基因拼接方法构建人源特异性抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab噬菌体抗体库被引量：2
《中国生物制品学杂志》2004年第5期257-260,共4页张爱华 闭兰 端义坤 张智 赵亚杰 孙可芳 闫莹 王志友 余模松 
目的　构建人源特异性抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab噬菌体抗体库。方法　从抗乙型肝炎病毒表面抗体高滴度 (1:10 2 4 )的人全血中分离外周血单个核细胞 (PBMC) ,经RT PCR分别扩增出轻链可变区和重链可变区 ,再以噬菌体质粒为模板分别扩增...
关键词：基因拼接 乙型肝炎病毒 表面抗原 噬菌体抗体库 
应用疏水层析纯化HIV-1跨膜蛋白gp41截短体包涵体被引量：2
《中国生物制品学杂志》2004年第3期166-167,共2页端义坤 汪超英 孙可芳 张涛 
目的对表达HIV-1跨膜蛋白gp41截短体包涵体进行纯化。方法将收获的表达菌体洗涤、超声波破菌、预处理后进行疏水层析。结果纯化后的gp41截短体的融合蛋白纯度达到90％,并且具有较好的抗原性和特异性。结论利用疏水层析可以将目的蛋白进...
关键词：人类免疫缺陷病毒1型 HIV-1 跨膜蛋白 GP41 包涵体 纯化 疏水层析 
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