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作 者:陈琳[1] 徐秀英[1] 刘士辉[1] 朱恒奇[1] 黄培堂[1]
机构地区:[1]军事医学科学院生物工程研究所,北京100071
出 处:《细胞生物学杂志》1996年第2期86-89,共4页Chinese Journal of Cell Biology
摘 要:组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)因其在防止血栓形成中起重要作用而受到人们的重视。但由于t-PA在血液中半衰期很短,作为溶栓药,一时难于推广。为了延长半衰期、增强其特异活性,本组构建了t-PA突变体并在CHO-dhfr^-细胞中获得了高效表达。我们在细胞培养基中加入秋水仙素,通过低张、固定、染色,进行染色体分析,结果表明,t-PA工程细胞系染色体条数为20条,畸变类型有异着丝粒。四倍体、裂隙、断片,畸变率为15%,属于正常范围。同时我们对该细胞系进行成瘤性试验,选用4周龄裸鼠作为试验鼠,以Hela细胞为阳性对照,CHO-dhfr^-细胞为阴性对照,试验表明:t-PA工程细胞及表达产物对裸鼠均无成瘤性。Recombinant t-PA is a new thrombolytic agent, it has a high affinity for fibrin. But as a new thrombolytic agent, it has some disadvantages, such as rapidly eliminated by the hepatic cells from the circulation and inhibited by plasmiriogen activator inhibitor-l, these results in its shorter half-life in human plasma and needing a high concentration in vein by contin-ous infusion. In order to prolong its half-life fand increase resistance to PAl-1, We constructed t-PA engineering cell line. The results of hereditary feature and oncogenic analysis show that t-PA engineering cell line have normal hereditary feature and don't produce tumour in nude mice.
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