刘士辉

作品数：32被引量：40H指数：4
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供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
发文主题：T-PA组织型纤溶酶原激活剂突变体纤溶酶原激活剂特性分析更多>>
发文领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
发文期刊：《解放军药学学报》《中华微生物学和免疫学杂志》《中国应用生理学杂志》《生物技术通讯》更多>>
所获基金：国家自然科学基金更多>>
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人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体在CHO细胞中表达产物的纯化研究被引量：1
《解放军药学学报》2000年第3期117-119,共3页赵庆国 张郁 黄培堂 刘士辉 焦保权 
目的 :为了从细胞株培养液中纯化长半衰期的t PA组合突变体FrGGI。方法 :采用高表达克隆细胞株 ,进行大量培养 ,收集 2 4h细胞培养液为初始材料 ,利用t PAK2区含有Lysine结合位点的特性和Zn2 +与蛋白质中咪唑、巯基等基团螯合作用 ,经Ly...
关键词：组织型纤溶酶原激活剂 突变体 纯化 CHO细胞 
野生型组织型纤溶酶原激活剂工程细胞株生物学特性分析
《解放军医学杂志》1999年第4期293-295,共3页徐秀英 陈琳 欧阳应斌 刘士辉 朱恒奇 黄培堂 黄翠芬 
组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）是体内丝氨酸类蛋白酶。它能激活纤维蛋白溶酶原生成纤溶酶，后者将不溶性的纤维蛋白降解为可溶性肽段，使血栓溶解，血管再通。而且由于它与纤维蛋白有高亲和力，只激活血栓表面纤溶酶原，溶解局部血...
关键词：野生型 T-PA 工程细胞株 纤溶酶原激活剂 
组织型纤溶酶原激活剂突变体细胞t—PA基因拷贝数测定及分析
《生物技术》1998年第2期16-18,共3页陈琳 徐秀英 刘士辉 朱恒奇 黄培堂 
组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）溶栓特异性高，但半衰期短。本组构建了增强纤维蛋白亲合力和延长半衰期的t—PA突变体表达细胞株。测定工程细胞株基因拷贝数是细胞生物学特性鉴定的一个方面。我们采用狭缝杂交法和SouthernBlot法对该细...
关键词：突变体 拷贝数 组织型 纤维酶原激活剂 
组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体工程细胞株生物学特性分析
《实验生物学报》1998年第2期111-116,共6页陈琳 徐秀英 刘士辉 朱恒奇 黄培堂 黄翠芬 
t-PA突变体工程细胞株FSGGI48形态与其亲代细胞CHO-dhfr相似呈多角形,类似上皮细胞。在MTX加压至5×10^(-6)mol/L时,少数细胞形态略变瘦长,但仍呈多角形,因此该工程细胞株形态正常。抗体中和抑制试验及纤维蛋白板80℃加热试验显示,FSGG...
关键词：T-PA 突变体 工程细胞株 生物学特性 
野生型组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)工程细胞株生物学特性分析
《生物技术通讯》1997年第1期14-16,共3页徐秀英 陈琳 欧阳应斌 刘士辉 朱恒奇 黄培堂 黄翠芬 
野生型t-PA工程细胞4B3形态与亲代细胞CHO-dhfr-相似呈多角形,类似上皮细胞。在MTX加压达5×10^(-7)mol/L时,少数细胞略变瘦长,但仍显多角形,形态正常。细胞无血清培养上清经FAPA检测,亚克隆株表达水平为10~6细胞4000～5000IU/24h。细...
关键词：野生型t-PA 工程细胞株 特性分析 
人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)组合突变体FrGGl在CHO细胞中的高效表达被引量：5
《生物工程学报》1997年第1期98-101,共4页赵庆国 黄培堂 刘士辉 
国家自然科学基金
为了得到ｔＰＡ组合突变体ＦｒＧＧＩ在ＣＨＯ细胞中的高效表达，将表达质粒筛选基因启动子上游的增强子（ｅｎｈａｎｃｅｒ）去除，构建了ＦｒＧＧＩ真核表达质粒ｐＺＬＦｒＧＧＩ。酶切线性化后，采用大剂量ＤＮＡ电击介导法，转染...
关键词：药物 组织型 纤溶酶原激活剂 突变体 基因表达 
t-PA F-E复合片段的三维结构模建及其结构与功能关系的研究
《生物技术通讯》1997年第Z1期183-184,共2页王国力 刘士辉 黄培堂 黄翠芬 
组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是一种在血栓和心梗的临床治疗中具有巨大应用前景的蛋白分子。野生型t-PA由于半衰期短,用量大,在实际治疗过程中会产生一些副作用,因此研制半衰期适当延长、血栓特异性增强的新型t-PA突变体非常重要。大量...
关键词：结构与功能关系 复合片 三维结构 t-PA突变体 分子力学和分子动力学 t—PA 医学科学院 工程研究 酶原激活剂 电势分布 
组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)工程细胞系遗传特性及成瘤性分析
《细胞生物学杂志》1996年第2期86-89,共4页陈琳 徐秀英 刘士辉 朱恒奇 黄培堂 
组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)因其在防止血栓形成中起重要作用而受到人们的重视。但由于t-PA在血液中半衰期很短,作为溶栓药,一时难于推广。为了延长半衰期、增强其特异活性,本组构建了t-PA突变体并在CHO-dhfr^-细胞中获得了高效表达。...
关键词：组织型 纤溶酶原激活剂 T-PA 工程细胞系 遗传性 
组织型纤溶酶原激活剂工程细胞系遗传特性及成瘤性分析
《生物技术通讯》1996年第2期66-68,共3页陈琳 徐秀英 刘士辉 朱恒奇 黄培堂 
构建了突变体t-PA,使其在CHO-dhfr细胞中表达。获得t-PA工程细胞系。对该细胞系进行了遗传特性分析,在培养基中加入秋水仙素,通过低张、固定处理并将细胞滴片、染色,进行染色体分析,结果表明,该工程细胞系染色体条数为20条,畸变类型有...
关键词：t-PA工程细胞系 遗传特性 成瘤性 
吖啶酯发光法测定组织型纤溶酶原激活剂活性的研究
《中华血液学杂志》1996年第3期157-158,共2页徐秀英 刘农乐 陈琳 王珏 欧阳应斌 刘士辉 蒋滋慧 黄培堂 
吖啶酯发光法测定组织型纤溶酶原激活剂活性的研究徐秀英刘农乐陈琳王珏欧阳应斌刘士辉蒋滋慧黄培堂血栓疾病为危害人们生命安全的主要疾病之一，在几种研究较多的纤溶药物中，组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）由于其纤溶作用的特异性...
关键词：纤溶酶原 激活剂 吖啶酯发光法 血栓形成 
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