角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的研制  

作　　者：程萱[1] 毛春明[1] 杨晓[1] 

机构地区：[1]军事医学科学院生物工程研究所发育和疾病遗传学研究室,北京100071

出　　处：《中国比较医学杂志》2006年第9期560-560,共1页Chinese Journal of Comparative Medicine

摘　　要：本研究采用转基因技术中最常用的受精卵原核显微注射法,制备角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠。我们将经过超排处理的供体雌鼠拉颈处死,从其输卵管壶腹部取出卵丘细胞团,用透明质酸酶消化、清洗,得到形态饱满、极体和双原核明显的受精卵培养。将构建好的包括角质细胞特异性角质素5(K5)启动子、Cre重组酶基因和人生长激素(hGH)polyA的转基因载体pK5-Cre-hGH制备成一定浓度的注射片段,通过显微注射的方法将4.2 kb的转基因片段引入小鼠受精卵的雄原核。共注射了720枚受精卵,移植至29只假孕母鼠的输卵管中发育,获得子代小鼠48只,经PCR鉴定有12只小鼠在基因组上整合有Cre基因,整合率为25%。此结果通过Southern杂交得到进一步证实。

关 键 词：受精卵 原核显微注射法 CRE基因 

分 类 号：R394-33[医药卫生—医学遗传学] R373.21[医药卫生—基础医学]