人GST-OPGL融合蛋白的原核表达与抗体制备  

作　　者：杨彤涛[1] 张勇[1] 高杰[1] 杨辉[2] 刘继中[3] 陈苏民[2] 范清宇[1] 马保安[1] 

机构地区：[1]第四军医大学唐都医院骨科,西安710038 [2]第四军医大学生物化学教研室 [3]第四军医大学西京医院骨科

出　　处：《陕西医学杂志》2006年第11期1439-1442,共4页Shaanxi Medical Journal

摘　　要：目的:克隆人骨保护素配体(OPGL)编码区基因,构建融合表达载体,在大肠杆菌中表达,并制备抗体。方法:采用RT-PCR法得到人骨保护素配体(OPGL)编码区cDNA,克隆入原核表达载体pGEX-4T-3,转化大肠杆菌感受态细胞JM 109,0.1mMβ-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后收集菌体蛋白,行SDS-PAGE电泳。将此融合蛋白免疫新西兰兔,W estern b lot鉴定。结果:获得人骨保护素配体编码区cDNA,构建原核表达载体pGEX-OPGL,转化菌株可表达人GST-OPGL蛋白,蛋白分子量约为43KD,蛋白表达量约为菌体总蛋白的21%。W estern b lot检测表明获得了免疫活性强的兔抗人的多克隆抗体。结论:获得人骨保护素配体编码区cDNA,在大肠杆菌中表达了人GST-OPGL融合蛋白,并获得了高效多抗。

关 键 词：骨保护素配体 基因融合 基因表达 大肠杆菌/免疫学 遗传载体 

分 类 号：R394[医药卫生—医学遗传学]