利用套叠PCR技术改造人可溶性TRAILcDNA片段及真核表达载体的构建  

Modification of Human Soluble TRAIL Gene by Overlap Extension of PCR and Construction of Eukaryotic Expression Vector

作　　者：朱明月[1] 沈文涛[1] 周鹏[1] 

机构地区：[1]中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室

出　　处：《生命科学研究》2006年第4期309-312,共4页Life Science Research

基　　金：海南省教育厅科研基金项目(Hjkj200507)

摘　　要：利用套叠PCR技术对可溶性TRAIL基因片段(sTRAIL,114aa-281aa)的“KEX2”位点及“ATTTA”位点分别进行改造,并构建真核表达载体;结果表明:成功获得了3种突变基因:sTRAILK、sTRAILA以及sTRAILAK,并成功构建了4种分泌型酵母表达载体:pPICZα-A-sTRAILK,pPICZα-A-sTRAILA,pPICZα-A-sTRAILAK以及pPICZα-A-sTRAIL.SOEing technique was used to modify the ＂KEX2＂ site and ＂ATTTA＂ site of the soluble TRAIL gene fragment （114aa-281 aa） and to construct eukaryotic expression vector. The results indicate that three kinds of modified sTRAIL genes which contain KEX2 mutation（sTRAILK） or ATTTA mutation（sTRAILA） or both of the two（sTRAILAK） and four kinds of recombinant expression vectors which are pPICZ.-A-sTRAIL, pPICZα-A-sTRAILK, pPICZα-A-sTRAILA and pPICZα-A-sTRAILAK, were successfully obtained.

关 键 词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL) 套叠PCR 基因突变 真核表达载体 

分 类 号：Q782[生物学—分子生物学]